电针对脑缺血大鼠海马GFAP和NGF表达的影响

来源 :北京中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wybyoung
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目的探讨(1)电针对脑缺血大鼠行为学以及脑缺血半暗带区、海马CA1、CA2、CA3、齿状回(dentate gyrus,DG)区胶质细胞原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和神经生长因子(nerve grow factor,NGF)表达的影响。(2)电针对高血脂合并脑缺血模型大鼠血脂、行为学、脑组织形态学和脑缺血半暗带区、海马CA1、CA2、CA3、DG区GFAP和NGF表达的影响。方法实验一将24只雄性SD大鼠随机分为假手术组、脑缺血模型组、电针1组、电针2组。大鼠使用普通饲料喂养7天,第8天采用50%FeCl3诱导建立脑血栓模型。电针1组造模前电针“丰隆”,每天1次,治疗7天,第8天造模后电针“丰隆”、“百会”穴,每天1次,持续7天。电针2组第8天造模后电针“丰隆”、“百会”穴,每天1次,持续7天。造模完成1天后对所有大鼠进行神经功能评分,术后第1、7天采用免疫组织化学法检测缺血侧皮层缺血半暗带和大脑海马CA1、CA2、CA3、DG区GFAP和NGF的表达。实验二将49只雄性SD大鼠随机分为正常组、高血脂合并假手术组、高血脂合并脑缺血模型组、电针1组、电针2组。正常组大鼠使用普通饲料喂养63天。假手术组大鼠使用高脂饲料喂养63天。模型组和电针组大鼠喂养高脂饲料49天,第50天采用50%FeCl3诱导建立高血脂合并脑血栓模型。电针1组造模前电针“丰隆”,每天1次,治疗7天,造模后电针“丰隆”、“百会”穴,每天1次,持续14天。电针2组造模后电针“丰隆”、“百会”穴,每天1次,持续14天。造模完成1天后对所有大鼠进行神经功能评分,术后第1、7、14天检测血清中总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)水平,采用 HE(hematoxylin-eosin,HE)染色法观察神经元细胞形态学变化;采用免疫组织化学法检测缺血侧皮层缺血半暗带和大脑海马CA1、CA2、CA3、DG区GFAP和NGF的表达。结果实验一:(1)神经行为学:模型组大鼠出现向对侧转圈的神经缺损症状,且神经功能评分较高。与模型组相比,电针组的神经缺损症状减轻,神经功能评分降低,其中电针1组的差异有统计学意义(P<0.05)。(2)免疫组化结果:在缺血半暗带中,模型组GFAP的平均光密度在术后1、7天普遍升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,电针1组GFAP的平均光密度在术后7天具有增高趋势;电针2组GFAP的平均光密度在术后1天增高,差异有统计学意义(P<0.05)。海马CA1中,模型组GFAP的平均光密度在术后1、7天普遍升高,差异具有统计学意义(P<0.01)。与模型组相比,电针1组、2组GFAP的平均光密度在术后1、7天降低,差异有统计学意义(P<0.05)。海马CA2区,模型组GFAP的平均光密度在术后1、7天普遍升高,差异具有统计学意义(P<0.01)。与模型组相比,电针1组GFAP的平均光密度在术后1、7天降低,差异具有统计学意义(P<0.05);电针2组GFAP的平均光密度术后1、7天具有降低趋势。海马CA3区,模型组GFAP的平均光密度在术后1、7天普遍升高,差异具有统计学意义(P<0.01)。与模型组相比,电针1组、2组GFAP的平均光密度在术后1、7天降低,差异具有统计学意义(P<0.01)。海马DG区,模型组GFAP的平均光密度在术后1、7天普遍升高,差异具有统计学意义(P<0.01)。与模型组相比,电针1组GFAP的平均光密度在术后1、7天降低,差异具有统计学意义(P<0.05);电针2组GFAP的平均光密度在术后7天降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。海马CA1区,模型组NGF的平均光密度在术后1、7天普遍升高,差异具有统计学意义(P<0.01)。与模型组相比,电针1组NGF的平均光密度在术后7天升高,差异具有统计学意义(P<0.01);电针2组NGF的平均光密度在术后1、7天升高,差异具有统计学意义(P<0.01)。实验二:(1)血脂四项:高脂血症大鼠合并脑缺血模型组大鼠术后1、7、14天TC、LDL升高,差异具有统计学意义(P<0.05),术后7天HDL降低,差异具有统计学意义(P<0.05),术后14天TG升高,差异具有统计学意义(P<0.05),说明高脂血症模型造模成功且模型稳定。与模型组相比,电针1组术后1天TC下降,差异具有统计学意义(P<0.05),术后7天LDL下降,差异具有统计学意义(P<0.05),术后14天LDL、TG下降,差异具有统计学意义(P<0.05);电针2组术后1天TC下降,差异具有统计学意义(P<0.05),术后14天TG、LDL下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。说明电针干预可能有降低大鼠血清血脂水平的作用,电针1组的降低程度比电针2组高,说明电针预治疗降血脂的效果更好。(2)神经行为学:模型组大鼠出现对侧上肢无力,向对侧转圈等神经缺损症状,神经功能缺损评分得分较高。与模型组相比,电针1组、2组的神经缺损症状减轻,神经功能评分降低,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)脑组织形态:缺血半暗带,正常组神经元细胞形态完整,整体组织形态正常;模型组神经元胞体缩小,胞核固缩或溶解,细胞周围间隙增大,细胞排列紊乱;电针组神经元形态接近正常,可见部分异常形态神经元细胞,整体组织形态接近正常。海马CA1、CA2、CA3、DG区,正常组神经元细胞排列整齐,层次清晰,形态完整;模型组细胞排列不规则,部分细胞散乱分布;电针组神经元排列相对整齐,形态相对完整。(4)免疫组化结果:在缺血半暗带中,模型组GFAP的平均光密度在术后1、7、14天普遍增高,差异具有统计学意义(P<0.01)。与模型组相比,电针1组GFAP的平均光密度在术后7天增高,术后14天降低,差异有统计学意义(P<0.01);电针2组GFAP的平均光密度在术后1天、14天降低,差异有统计学意义(P<0.05)。海马CA1区,模型组GFAP的平均光密度在术后1、7天增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,电针1组、2组GFAP的平均光密度在术后1、7、14天普遍降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。海马CA2区,模型组GFAP的平均光密度在术后1、7、14天普遍增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,电针1组GFAP的平均光密度在术后7天具有升高趋势,术后14天降低,差异具有统计学意义(P<0.05);电针2组GFAP的平均光密度在术后7天具有升高趋势,术后14天降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。海马CA3区,模型组GFAP的平均光密度在术后1、7、14天普遍增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,电针1组GFAP的平均光密度在术后7天升高,术后14天降低,差异具有统计学意义(P<0.05);电针2组GFAP的平均光密度在术后7天具有升高趋势,术后14天有降低趋势。海马DG区,模型组GFAP的平均光密度在术后1、14天升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,电针1组GFAP的平均光密度在术后7天升高,差异具有统计学意义(P<0.01),术后14天有降低趋势;电针2组GFAP的平均光密度在术后7天升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。海马CA1区,模型组NGF的平均光密度术后1、7、14天具有升高趋势。与模型组相比,电针1组NGF的平均光密度在术后1、7、14天升高,差异具有统计学意义(P<0.05);电针2组NGF的平均光密度在术后1天升高,差异具有统计学意义(P<0.05),在术后7、14天有升高趋势。结论在脑缺血阶段电针“丰隆”,脑缺血后后电针“丰隆”、“百会”,能够减轻脑缺血大鼠神经缺损功能,降低神经功能评分,促进脑组织及神经元细胞形态的恢复,调节大鼠缺血侧缺血半暗带和海马CA1、CA2、CA3、DG区GFAP与CA1区NGF的表达,调节星形胶质细胞的活化表达,修复受损的神经系统。在高血脂阶段电针“丰隆”,脑缺血后电针“丰隆”、“百会”,能够调节大鼠血清中血脂的代谢,减轻脑缺血大鼠神经缺损功能,促进脑组织及神经元细胞形态的恢复,调节大鼠缺血侧缺血半暗带和海马CA1、CA2、CA3、DG 区 GFAP 与 CA1 区 NGF 的表达。
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