目的：口腔鳞癌全称为口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinomas OSCC),是发病率最高的口腔恶性肿瘤,多在中年发病,以男性患者居多,多发生在舌、颊、牙龈、腭部,恶性程度较高,常向区域淋巴结转移,晚期还可发生远处转移。一般认为OSCC多由口腔癌前病变发展而来,依次经历了正常→癌前病变→原位癌→浸润癌的发展过程,绝大多数的OSCC都具有明确的癌前损害阶段,因此早期发现OSCC的癌前病损,给予早诊断、早治疗可以提高OSCC患者的5年生存率。21世纪以来,医学科学技术得到了飞速发展,越来越多的医学科研者致力于探索肿瘤早期标志物并将其用于肿瘤早期阶段的诊断,对于及早发现肿瘤和确诊肿瘤有着独特的作用。Wnt/β-catenin是已证实的一种在控制胚胎发育的过程中起着关键作用、在生物进化上具有高度保守性的信号传导通路,它的异常激活诱发众多人类癌症。Wnt/β-catenin信号传导通路受拮抗剂或激动剂调节,众多研究表明拮抗剂能抑制它的基因异常活化后导致的胞浆内游离型的β-catenin不断积聚并逐渐转入胞核内而激活下游的癌基因的作用,从而抑制肿瘤的发生、发展的作用。有学者研究发现抑癌基因Dkk-3对Wnt/β-catenin的信号转导通路具有抑制作用,它能阻断β-catenin在胞质中大量聚集,从而使得β-catenin不能进入胞核启动的下游的原癌基因。本实验采用泸州医学院口颌面修复重建和再生实验室利用4NQO(4-硝基喹啉-1-氧化物)诱发SD大鼠口腔黏膜癌变所获得的颊部组织,通过HE染色进行病理分级,免疫组化检测各阶段Dkk-3及β-catenin的蛋白表达,同时探讨Dkk-3及β-catenin与OSCC发生发展的相关关系,为OSCC的防治提供新的依据。方法：60只雄性SD大鼠(死亡2只),阴性对照组10只采用饮用自来水：实验组50只饮用水中加入4NQ0 (40ppm)诱导癌症发生,于第9周开始每间隔4周后的周末随机处死10只实验组SD大鼠,最后一周周末同时处死阴性对照组SD大鼠,切取口内黏膜组织,石蜡包埋后切片,并对切片进行HE染色,2名资深的病理老师对切片进行病理诊断和分级。应用免疫组化(SP)法检测各样本中Dkk-3及β-catenin 蛋白的表达水平,并对测得的结果进行统计分析(SPSS 20.0)。结果：1.通过HE染色病理分级后获得正常颊黏膜16例,轻、中、重度颊粘膜上皮异常增生颊粘膜各11例、12例、10例,颊癌9例。2. β-catenin免疫组化染色结果显示：β-catenin主要位于正常颊粘膜上皮细胞的胞膜上,随着上皮异常增生程度的增加开始出现胞浆表达,在重度异常增生组中胞浆中大量表达和核膜少量表达,鳞癌组中只在胞核有表达。正常组p.catenin的异位表达率仅为18.75%；轻、中度异常增生组中β-catenin的异位表达率分别为45.45%、58.33%；重度异常增生组中β-catenin的异位表达率达到了80%；而颊癌组中p-catenin异位表达率最高为88.89%。经卡方检验显示β-catenin异常表达率在总体中的差异具有统计学意义(P<0.05)；进而再进行相关性分析后显示β.catenin的异常表达率的差异与组织病理分级呈正相关关系(rs=0.386,p<0.05)。3.Dkk-3免疫组化染色显示：在SD大鼠正常颊粘膜的上皮细胞胞浆内可见大量棕黄色表达,尤棘层细胞着色更明显；随着上皮细胞异常增生程度的增加Dkk-3在胞浆中的表达量逐渐降低,并出现少量胞核表达；在颊癌组织中几乎无Dkk-3的表达。正常颊粘膜组织中Dkk-3的阳性表达率为81.25%；轻、中、重颊粘膜异常增生组中Dkk-3阳性表达率分别为63.67%、50%、20%；颊癌组中Dkk-3的阳性表达率为11.11%。卡方检验显示Dkk-3的阳性表达率在正常颊黏膜组至颊癌组的表达差异具有明显的统计学意义(P<0.01)；相关性分析后显示Dkk-3的阳性表达率与颊黏膜的病理分级成负相关关系(rs=-0.521,P<0.05)。4.Dkk-3和β-catenin在正常颊粘膜上皮至癌变过程中的表达差异显示,随着上皮异常增生程度的增加Dkk-3阳性表达率逐步降低而β-catenin的异常表达率却逐步升高,两者的表达差异经统计分析后显示有明显的负性相关关系(rs=-0.515,P<0.05)。结论：1. β-catenin在颊粘膜癌变过程中异常表达水平随着病理程度的加重而增加；2.在SD大鼠颊黏膜癌变过程中,Dkk-3在上皮细胞的阳性表达水平随着病变程度的加重逐渐降低；3.从SD大鼠正常颊粘膜至颊癌这一动态变化过程中Dkk-3表达水平的变化和β-catenin的异常表达之间出现负性的相关关系,提示我们Dkk-3可能作为抑癌基因而发挥作用,抑制β-catenin的异常表达,从而抑制异常激活的Wnt/β-catenin信号通路。