甲型流感病毒重组抗体在家蚕杆状病毒表达系统中的表达与检测

来源 :安徽农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:guawang
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
甲型流感病毒对人类和禽类的威胁旷日持久,严重影响着人类健康和养殖业的发展。本研究所涉及的FI6抗体来源于人的浆细胞,是前人通过单细胞培养法从志愿者的外周血浆细胞中分离出一种单克隆抗体,能够识别并结合H1-H16所有血清型亚型的病毒。本研究将FI6的VL段和VH段通过短肽相连得到其Fv段,随后使用铰链(Hinge)与鸡IgY和人IgG的Fc段相连,得到两条抗体,分别为鸡源性抗体(FI6C)和人源性抗体(FI6H)。将氨基酸序列进行密码子优化后加入Kozak序列以期提高其翻译起始效率;添加终止密码子TAA以提高蛋白翻译终止效率;删除基因内部常用酶切位点,在两端加入BamH I、EcoR I和Xba I、PstI酶切位点以便进行基因克隆操作。利用酶切连接的方法将目的片段连接至pVL1393转移载体,随后通过转移载体与失活拯救型穿梭质粒共转染家蚕细胞将目的片段重组入杆状病毒中。随后感染五龄家蚕,收集蚕血淋巴,通过PCR鉴定,Western blot等方法鉴定其在家蚕中表达。随后进行体外实验来检测所设计的重组抗体的生物学活性,血凝抑制实验显示FI6H和FI6C具有一定的血凝抑制效果,两者均为1:160,与血凝素结合的能力相当。而在鸡成纤维细胞上进行的病毒中和实验显示FI6H对细胞的保护作用要比FI6C 好,FI6H 组 PD50 为 104+23/mL 蚕血淋巴;FI6C 组 PD50 为 10-2.79/mL蚕血淋巴。结果显示本研究成功利用家蚕-杆状病毒表达系统来表达所设计的两条重组单链甲型流感病毒中和抗体,对其进行的生物学活性检测表明其具有良好的生物学活性。为对抗甲型流感病毒的广谱抗体的规模化生产奠定了基础,同时也为广谱疫苗的研发提供了思路。
其他文献
二维VA族单质材料由于具备独特的力学、电学、催化特性,成为了近年材料、物理、化学领域研究的重要研究方向。部分有关VA族锑烯与铋烯半导体性能、拓扑绝缘特性的预测已经得到了实验的证实。然而迄今为止,实现锑烯与铋烯的生长依然是制约锑烯及铋烯性能探究的瓶颈。一方面,目前锑烯及铋烯的制备方法有限,现有的方法很难实现锑烯及铋烯的大面积、高质量可控生长,另一方面,锑烯及铋烯的生长机理、影响生成产物形貌的因素仍有
在地震灾害发生后,会导致有一部分人员被困在废墟下,此时迫切需要一种快速、高效的侦查技术被应用到震后被困人员侦查与搜救中去。伴随着智能手机在市场上的大量使用的同时,
目前,在智能化海洋装备研究领域,动力定位(Dynamic Positioning,DP)系统的研究引起了众多学者的关注。对于在海洋中航行的DP船,保证其航行在期望的航迹上并沿着期望的航向航行是DP船在海洋中执行任务的基础,因此,对DP船循迹控制的研究是十分有必要的。对常规航迹的循迹控制方法的研究目前已经比较成熟,本文针对DP船在执行基于给定非光滑搜索带的特殊航迹循迹任务时的任务解决方案,分别研究了
六氯环三聚磷腈(HCCP),由于具有骨架稳定、易功能化等优点,广泛应用于功能材料领域。近年来,由于环三聚磷腈分子独特的生物药学特性,因此其在生物医学领域具有重要的应用前景。
随着交通运输的高速发展,交通事故日益严重,疲劳驾驶已成为交通事故主要原因之一,全球每年因疲劳驾驶引发的交通事故约占交通事故总数20%,疲劳驾驶干预成为汽车主动安全领域重要的研究方向。本课题依托扬州大学自制实验仪器设备项目“基于乘员姿态识别的乘用车智能座椅及主动安全系统研究”与扬州大学江苏省研究生科研创新计划项目“基于实车虚拟驾驶的主动提升安全系统”的资助,围绕着“疲劳驾驶识别与干预实车实验平台的研
β-Ga_2O_3作为一种新兴的超宽禁带半导体材料,它具有4.9 e V的禁带宽度、8 MV/cm的高击穿电场以及优良的Baliga品质因数等出色的特性。作为下一代大功率器件材料,β-Ga_2O_3受到了越来越多的关注。此外,β-Ga_2O_3在紫外探测器和气体传感器等领域也拥有着广阔的应用前景。当前,材料制备过程中产生的本征缺陷将对材料性质产生重要影响,而氧空位作为β-Ga_2O_3材料中常见的
近年来实验经济学与行为经济学迅猛发展,以最后通牒博弈、信任博弈为代表的利他规则博弈打破了传统理性经济人假说,博弈人在实验过程中的冒险行为与亲社会性行为使博弈人偏离了“自利”假设,成为行为经济学、心理学、社会学的研究热点,学者们开始从风险偏好与社会偏好角度解释实验博弈悖论。随后,学者们通过行为实验进一步研究了利他规则下亲社会性行为与具体社会偏好,但对利他规则设置下的风险偏好研究甚少。基于此,本文通过
软固体类凝胶材料应用日益广泛,涉及到社会中的各个领域,其脱水及流变性是当前研究的热点。城市污泥属于典型的软固体类凝胶材料。随着城市化进程的加快,市政污泥的排放量急剧增加,且很难脱水,在不加预处理的情况下甚至无法脱水。本研究以城市污泥为对象,建立了适用于软固体类凝胶材料的渗透率方程以及探究了污泥的流变性能,为软固体类凝胶的过滤脱水和流变性能提供理论基础。为提高污泥的脱水性能,通常采用化学调理、物理调
随钻扩眼是能够有效解决在小井眼井、深井和超深井中井眼缩径、地层蠕变的关键钻井工艺,它能优化井身结构、提高钻固井效率、降低作业成本。目前针对于随钻扩眼钻具的研究大
在人类商业发展历史中,公司制度无疑是一项伟大的发明。伴随着公司制度一起出现的如何优化公司组织结构和组织方式,提高公司效率的问题,是考验着无数管理者的永恒课题。从直线制、职能制、科层制到事业部制、矩阵制,再到阿米巴组织、平台型组织,公司的组织结构理论研究和实践不断发展,它们在不同的历史时期和不同的企业分别发挥了重大作用。随着科学技术的发展,人类社会逐步进入计算机时代、互联网时代甚至智能时代,各个公司