随着纳米技术的迅速发展,纳米材料逐渐被应用到生命科学领域,为其研究和发展提供了新的技术和手段。磁性纳米粒子(Magnetic Nanoparticles,MNPs)作为纳米材料的一个重要组成部分,由于其在缓冲体系中具有比较好的分散性、较高的表面积和易分离的特点,目前已被广泛应用于各种生物信号的检测等方面。另外,化学发光免疫分析方法(Chemiluminescent immunoassay,CLIA)具有灵敏度高,特异性好,线性范围宽等特点,为病原体检测提供了一个良好的平台。本课题的主要内容是结合化学发光免疫分析方法和磁性纳米粒子技术的优点,建立快速灵敏地检测病原体的新技术。具体内容包括： 1.磁性纳米复合颗粒的制备 我们探索了一种合成单分散纳米级的超顺磁性Fe3O4/PVA微球新方法,结合改进的微乳液聚合和溶胶凝胶技术,即在微乳液聚合之后,将聚合产物水解(改进处)之后采用溶胶凝胶技术在其表面包埋上二氧化硅。用TEM对不同工艺下获得的颗粒的形貌和结构进行了表征。结果表明中间产物Fe3Oa/PVAc颗粒的平均尺寸为50～100nm,终产物(Fe3O4/PVA)/SiO2的尺寸在一定范围(100～500nm)是可调的。 2.免疫磁珠的制备 醛基化磁珠对BSA具有最强的捕获能力,并且磁珠捕获蛋白质后至少在一周内是牢固的；在-20℃～37℃范围内,醛基化磁珠结合BSA具有耐温性。在制备免疫磁珠时,我们发现当多抗浓度小于0.4mg/mL时,磁珠的吸附量随着多抗浓度的增加而增加；当多抗浓度大于0.4mg/mL时,磁珠的吸附量几乎不变。 3.化学发光发磁酶免疫法检测E.coli O157:H7 我们在试验中,开发了具有特色的检测方法：采用了多抗制备免疫磁珠,一方面避免了筛选合适单抗对的过程,另一方面节约了成本；采用商品化的酶标记二抗,省去了制备酶标记单抗的步骤。应用这种检测方法的特异性比较好,灵敏度为103CFU/mL,检测时间为2h。