目的 压疮(PU)是重症监护病房(ICU)及长期卧床的患者最常见的并发症之一。本项目,拟利用大鼠压疮模型,制备自体富白细胞-血小板纤维蛋白凝胶,观察其对大鼠压疮愈合的治疗效果。同时,利用体外细胞、免疫印迹(WB)和免疫组化(IHC)等实验,探讨其可能的体内外机制,为临床应用该技术治疗压疮奠定理论和实验基础。方法(1)利用“缺血再灌注损伤”原理制备大鼠压疮模型。(2)采集压疮模型大鼠的静脉血,制备自体富白细胞-血小板纤维蛋白凝胶,观察其对大鼠压疮愈合的治疗效果。(3)含自体富白细胞-血小板纤维蛋白凝胶浸出液的1640培养基的制备。(4)体外细胞增殖、迁移小室(Transwell)及划痕愈合试验分析富白细胞-血小板纤维蛋白凝胶对血管内皮细胞的增殖和迁移能力的影响。(5)利用WB和IHC法分析富白细胞-血小板纤维蛋白凝胶对血管内皮细胞及压疮组织中血管内皮生长因子(VEGF)的表达影响。结果(1)利用“缺血再灌注损伤”原理,成功制备了大鼠压疮模型。随后利用自体富白细胞-血小板纤维蛋白凝胶薄膜进行大鼠压疮模型的压疮治疗效果观察。结果显示,自体富白细胞-血小板纤维蛋白凝胶能够显著促进大鼠压疮的创面愈合。(2)体外细胞实验结果显示,含富白细胞-血小板纤维蛋白凝胶浸出液的培养基,能够显著促进血管内皮细胞的增殖、迁移能力。(3)压疮组织HE染色结果显示,与对照组相比较,富白细胞-血小板纤维蛋白凝胶显著促进真皮愈合,在凝胶处理第七天时,可以观察到其真皮层愈合基本完整。WB和IHC结果显示,与对照组相比,自体富白细胞-血小板纤维蛋白凝胶处理后,压疮组织和血管内皮细胞中的VEGF表达显著增高。结论 自体富白细胞-血小板纤维蛋白凝胶能够促进压疮的愈合,其可能作用机制与其可以促进血管内皮细胞增殖、迁移能力和促进血管内皮细胞及压疮组织中VEGF表达有关。