目的:阐明大黄附子汤配伍机制及治疗急性胰腺炎的物质基础。方法:大黄附子汤始载于《金匮要略》,由大黄、附子、细辛三味药物组成(3:4:1),临床常用于治疗急性胰腺炎,其配伍机制及药效物质基础研究空白。本论文应用代谢组学,组织切片和中药药物代谢动力学比较的方法从体内角度初步阐明大黄附子汤的配伍机制。代谢组学的研究方法为:收集空白大鼠尿液及灌胃给予单味药大黄,大黄附子汤4周以后的大鼠尿液,尿液样品经衍生化后应用GC-MS分析,数据处理应用chemstation导出AIA文件后,R2软件进行化合物保留时间,峰面积和质核比校正,形成二维数据矩阵,应用Simca-P软件对该矩阵进行PLSDA统计分析,模型预测良好,VIP值大于1.5的化合物为潜在差异性代谢标志物,差异性分析和相对标准偏差筛选得出:大黄组的琥珀酸值显著性升高(p<0.01),而大黄附子汤组与空白组的琥珀酸含量无显著性差异。琥珀酸是三羧酸循环中重要的中间产物,在大黄组中大幅度升高,提示大黄可能抑制了琥珀酸脱氢酶活性,而线粒体是三羧酸循环进行的场所,线粒体的损伤可使琥珀酸脱氢酶活性呈不可逆下降趋势,推测大黄对线粒体的损伤作用是产生肾毒性的主要原因。组织切片结果表明,大黄组大鼠的肾脏存在组织间隙出血,大黄附子汤组与空白组大鼠均未出现上述症状。应用LC-MS检测大黄单味药和大黄附子汤中大黄酸、大黄素、芦荟大黄素在大鼠血浆中的含量,LC-MS/MS检测大黄酚和大黄素甲醚在大鼠血浆中的含量,生物样品处理方法均为液液萃取法,对生物样品测定方法的精密度、准确度、回收率、基质效应、稳定性进行考察,成功建立大黄酸、大黄素、芦荟大黄素、大黄素甲醚和大黄酚5种蒽醌类成分的体内分析方法,应用WinNonlin软件对药动学结果进行拟合,计算5种蒽醌类成分的药动学参数。应用LC-MS分析附子单味药和大黄附子汤中生物碱类成分在大鼠血浆中的含量,生物样品处理方法为液液萃取法,进行方法学考察后,建立苯甲酰新乌头碱,苯甲酰乌头碱,苯甲酰次乌头碱,次乌头碱的体内分析方法,应用WinNonlin软件进行拟合,计算4种生物碱类成分的药动学参数。通过比较大黄单味药组,附子单味药组与大黄附子汤组的药物代谢动力学参数,如药时曲线下峰面积,最大峰浓度,达峰时间,半衰期等,阐明大黄附子汤配伍的机制,主要表现为配伍后蒽醌类成分达峰时间延长,峰浓度降低,配伍缓和了大黄的峻猛之性,大黄附子汤组次乌头碱的tmax与附子提取物组比较有明显延迟,表明配伍后延缓毒性成分的吸收速率,降低药物过快达峰而降低毒性反应。确保了临床用药的安全性。应用药物代谢动力学-药效动力学,即PK-PD(Pharmacokinetics-pharmacodynamics)相关,谱效相关的科学方法阐明复方发挥药效的物质基础。通过中药药物代谢动力学研究,建立药物浓度时间-曲线。建立大鼠急性胰腺炎模型,造模方法为胰胆管逆行注射牛黄胆酸钠,测定手术后1h,3 h,6 h,9 h,12 h,24 h的血清淀粉酶含量,以保护率为PD效应指标,建立药效动力学-时间曲线。应用MATLAB软件对PK和PD数据进行拟合,拟合计算方式为多元非线性拟合,通过对r值和l值的评价,得出大黄附子汤治疗急性胰腺炎的物质基础为:大黄酚和芦荟大黄素。应用HPLC-Q-TOF-MS分析大黄附子汤不同组方(单味药组,两味药组合组,大黄附子汤组)中的大黄和附子中的成分,应用peakview(?)软件进行目标化合物峰查找,得出各化合物的色谱峰面积。应用SPSS 16.0软件进行谱效相关计算,计算方法为Pearson相关,相关系数大于0.6的化合物为大黄附子汤治疗急性胰腺炎的物质基础。结果表明大黄中的大黄素甲醚,大黄酸,大黄素,白藜芦醇,决明松-8-O葡萄糖苷等及附子中的苯甲酰新乌头碱,新乌头碱,塔拉乌头碱,新乌头碱,附子宁碱和hydroxyaconitine为治疗急性胰腺炎的物质基础。结论:本论文通过以上方法成功阐明了大黄附子汤配伍机制及治疗急性胰腺炎的物质基础。