甘油糖脂具有抗氧化、抗病毒、抗菌、抗肿瘤、抗炎、抗动脉粥样硬化等多种生物活性,存在于动物的神经组织、植物和微生物中。本论文采用高速逆流色谱分离技术和制备型高效液相相结合的方法,以南瓜和生姜为原料,探索出一套完整的活性成分甘油糖脂的提取、分离、纯化的工艺。同时,对分离纯化的甘油糖脂单体进一步研究其生物活性,包括降血糖、抗炎、抗肿瘤及抗氧化活性,并阐明其结构与功效之间的关系,以期为进一步开发利用南瓜和生姜资源提供实验依据。研究结果如下：1、南瓜正丁醇提取物采用D4020型大孔吸附树脂,利用水和20%、40%、60%、80%和95%的乙醇溶液洗脱提纯得到不同极性的组分。60%的洗脱部分以二氯甲烷-石油醚-乙醇-水(6:2:4:4, v/v/v/v)为溶剂系统,采用双向洗脱方式,经高速逆流色谱HSCCC-D1200分离得到3种组分GCL1、GCL2和GCL3。进一步利用制备型反相高效制备液相色谱对3种组分进行分离纯化,以乙腈-水(55：45,v／v)为流动相,ODS-BP-A(250 mm×30 mm,15μm)为色谱柱,201 nm为检测波长,流动相流速为10mL/min,制备分离得到4个甘油糖脂单体,分别为：1-O-(9Z,12Z,15Z-octadecatrienoyl)-3-O-[β-D-galactopyranosyl-(1→6)-O-β-D-galactopyranosyl-(1→6)-O-β-D-galactopyranosyl] glycerol,1-O-(9Z,12Z-octadecadienoyl)-3-O-[β-D-galactopyranosyl-(1→6)-O-β-D-galactopyranosy l-(1→6)-O-β-D-galactopyranosyl] glycerol,1-O-(9Z,12Z,15Z-octadecatrienoyl)-3-O-[β-D-galactopyranosyl-(1→6)-O-β-D-galactopyranosyl-(1→6)-O-β-D-galacto-pyranosy l-(1→6)-O-β-D-galactopy ranosyl] glycerol和1-O-(9Z,12Z-octadecadienoyl)-3-O-[β-D-galactopyranosyl-(1→6)-O-β-D-galactop yranosyl-(1→6)-O-β-D-galactopyranosyl-(1→6)-O-β-D-galactopyranosyl] glycerol。它们的结构经EMS-MS、1HNMR、13CNMR、2D-NMR (TOCSY, HMQC, HMBC,和NOESY)鉴定为新化合物。2、生姜正丁醇提取物采用反相分离填料MCI GEL CHP 20P,利用水和30%、60%和90%的甲醇溶液洗脱提纯得到不同极性的组分。90%甲醇洗脱部分以石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(1:1:1:1, v/v/v/v)为溶剂系统,采用高速逆流色谱分离得到鞘糖脂大豆脑苷Ⅰ(Soya-cerebroside I)和富含甘油糖脂的另一组分A。FrA进一步利用制备型反相高效液相色谱法,在ODS-BP-A色谱柱(250mm×30mm,15μm)上,以乙腈-水(55：45,v／v)作为流动相,流速10 mL／min,检测波长201 nm,采用等度洗脱方式,得到2个甘油糖脂单体,分别为1-O-(9Z,12Z,15Z-octadecatrienoyl)-3-O-[α-D-galactopyranosyl-(1→6)-O-β-D-galactopyranosyl] glycerol和1-O-(9Z,12Z-octadecadienoyl)-3-O-[α-D-galactopy-ranosyl-(1→6)-O-β-D-galactopyranosyl] glycerol。60%甲醇洗脱部分以TBME-甲醇-水(2:1:1, v/v/v)为溶剂系统,采用高速逆流色谱分离得到4种化合物,分别为5-hydroxybomyl-2-O-β-D-glucopyranoside, (R)-3,7-Dimethyloct-2E-en-1,6,7-triol, p-epi-menthane-1,2,8-triol 2-O-β-D-glucopyranoside和p-menthane-1,2,8-triol 2-O-β-D-glucopyranoside o 30%甲醇洗脱部分以氯仿-甲醇-水(5:4:3, v/v/v)为溶剂系统,采用高速逆流色谱分离得到2种化合物,分别为1-(4-O-β-D-Glucopyranosyl-3-methoxyphenyl)-3,5-dihydroxydecane和apigenin-7-O-rutinoside。它们的结构经EMS-MS、1HNMR、13CNMR、2D-NMR(TOCSY, HMQC, HMBC,和NOESY)进行了鉴定,其中两种单萜苷为新化合物。3、采用长期高脂高糖饮食-链脲佐菌素(streptozotocin, STZ)诱导Ⅱ型糖尿病小鼠模型研究了6种甘油糖脂降血糖活性,结果表明,甘油糖脂(50 mg／(kg bw·d))有很好的降血糖效果。特别是四半乳糖亚麻酸单酰甘油(QGMG，18：3),其降血糖效果与模型对照组比较在第1周后即达显著水平,第2周后达极显著水平,且效果优于糖尿病药二甲双胍(P<0.05)。结构-活性相关性研究发现,降血糖活性与甘油糖脂分子中的糖基数目和脂酰基的饱和度有关。糖基数目越多,降血糖作用越强；脂酰基不饱和双键越多,活性越强。可以推断,糖基结构是甘油糖脂降血糖活性的必须结构,而不饱和脂酰基的存在对活性的提高具有协同效应。4、采用巴豆油所致炎症模型研究了6种甘油糖脂的抗炎作用,结果表明,甘油糖脂(20 mg／mL)具有显著的抗炎能力。构效关系研究表明,分子中半乳糖基数目一定,抗炎能力随着脂酰基不饱和程度的增加而提高；脂酰基组成相同,抗炎能力随着半乳糖基数目的增加而降低。5、采用MTT试验评价了6种甘油糖脂对COLO205、B16-F10、A549 3种肿瘤细胞株的体外细胞毒性。实验结果显示甘油糖脂对3种肿瘤细胞COLO205、B16-F10、A549的增殖具有一定的抑制作用,且呈一定的剂量关系,其中甘油糖脂对COLO205、B16-F1肿瘤细胞抑制效果比对A549肿瘤细胞更明显,提示其对不同肿瘤的抑制活性可能存在选择性差异。初步的构效关系表明,随着半乳糖基数目的增多,甘油糖脂抗肿瘤活性减弱,双糖或三糖活性较强,四糖活性较弱。糖苷键的类型(α、β)对活性也有一定的影响。如果半乳糖基存在α及β构型,糖基数目一定,脂酰基为亚油酸和脂酰基为亚麻酸的甘油糖脂的抗肿瘤活性差异较大,如DGMG(18:3)、DGMG(18:2)对人肺腺癌A549细胞的抑制作用相当,对人结肠癌COLO205细胞的抑制作用,DGMG(18:3)强于DGMG(18:2),而对小鼠黑色素瘤B16-F10细胞的抑制作用,DGMG(18:2)却强于DGMG(18:3)。如果分子中半乳糖仅存在β构型,糖基数一定,脂酰基为亚油酸的甘油糖脂活性大于脂酰基为亚麻酸的活性。6、采用DPPH-法评价了6种甘油糖脂单体的抗氧化活性,实验结果表明,在浓度范围50-500μg/mL内,各甘油糖脂单体对DPPH自由基具有一定的清除作用。构效关系表明,随着半乳糖基数目的增多,活性增强,双糖或三糖活性较弱,四糖活性较强。糖基构型不同,脂酰基饱和度的不同对活性影响也不同。如果分子中半乳糖基存在α及β构型,糖基数目一定时,脂酰基为亚麻酸的甘油糖脂抗氧化活性强于脂酰基为亚油酸的甘油糖脂；如果分子中半乳糖基仅存在β构型,糖基数目一定时,脂酰基为亚油酸的甘油糖脂抗氧化活性大于脂酰基为亚麻酸的甘油糖脂。