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目的:通过观察针刺对RA小鼠关节炎性症状的改善情况,检测针刺后RA小鼠外周血Treg细胞的表达及Th1、Th2细胞因子的分化状态,探讨针刺后Treg细胞对Th1/Th2细胞分化格局的影响,以期为针刺改善RA关节炎的机理提供依据。方法:将24只健康雄性Wistar小鼠随机分为空白组、模型组和针刺组。模型组、针刺组两组采用牛Ⅱ型胶原和弗氏佐剂制备类风湿性关节炎模型,空白组常规饲养。针刺组选取小鼠双侧的“肾俞”“足三里”穴运用毫针干预。每天毫针针刺30分钟,连续针刺6天为一疗程,共针刺3个疗程,每治疗一疗程结束后休息1天。余各组同针刺组束缚但不治疗。在造模前后、治疗前后,即(第1、14、21、42天)分别测量小鼠的体质量与足容积、并观测小鼠的关节炎症指数(AI)评分。取膝关节组织,用HE染色法,观察踝关节组织形态学的变化;采用联酶免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠外周血中IL-2、IL-4、IFN-γ和TNF-α的含量;用聚合酶链反应(PCR)实验方法,检测细胞中IL-2、IFN-γ、IL-4基因表达水平;用流式细胞术(FCM)检测针刺对Treg细胞标记分子Foxp3表达的影响。结果:1.小鼠体质量、足容积、AI评分及关节滑膜组织病理学变化:与空白组比较,模型组小鼠体质量减轻(P<0.01);足容积明显提高(P<0.01);AI评分亦提高明显(P<0.01);关节软骨损伤、滑膜组织炎细胞侵润、纤维组织增生皆显著提高(P<0.01),滑膜细胞和巨噬细胞存在增生(P<0.05)。与模型组相比,针刺组小鼠体质量增加明显(P<0.05);足容积减小(P<0.05);AI评分降低(P<0.01);炎细胞侵润降低(P<0.05),纤维组织增生明显减轻(P<0.01)。2.RA小鼠外周血中Th1、Th2相关细胞因子浓度及基因表达结果:与空白组比较,模型组外周血清中IL-2、TNF-α、IFN-γ浓度均增加,IL-4浓度降低(P<0.01);细胞中IL-2、IFN-γ基因表达升高(P<0.05),IL-4基因表达明显降低(P<0.01);与模型组相比,针刺组外周血清中IL-2、TNF-α、IFN-γ浓度均较低(P<0.05),IL-4浓度增加(P<0.05);细胞中IL-2、IFN-γ基因表达降低(P<0.05),IL-4基因表达无明显差异(P>0.05)。3.RA小鼠外周血中Treg细胞标记分子Foxp3的表达结果:与模型组相比,针刺组CD4+CD25+Foxp3+阳性表达升高(P<0.01)。结论:1.针刺能改善RA小鼠关节炎性症状,能使小鼠体质量的增加,膝关节的红肿消退,AI评分降低,并能减少小鼠膝关节组织中炎性细胞的侵润和纤维组织的增生,改善滑膜的损伤和骨关节的破坏。2.针刺可以降低小鼠血清中Th1炎症细胞因子含量及基因表达、提高Th2标志性细胞因子含量和Treg细胞标记分子Foxp3表达。由此推测,针刺可能通过刺激Treg细胞的表达,改善Th1/Th2细胞的分化失衡,减轻膝关节的炎症反应。这可能是针刺治疗本病的机理组成部分之一。