【摘 要】
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该文为了得到α-乳清白蛋白基因并建立该基因的转基因小鼠模型,我们使用人粘粒文库来筛选该基因.筛库方法是以PCR技术为基础,并克服了粘粒克隆扩增的不均一性.从扩增一次的粘
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该文为了得到α-乳清白蛋白基因并建立该基因的转基因小鼠模型,我们使用人粘粒文库来筛选该基因.筛库方法是以PCR技术为基础,并克服了粘粒克隆扩增的不均一性.从扩增一次的粘粒文库中,最后筛选到2个人α-乳清白蛋白基因阳性克隆(45Kb-55Kb);特异引物直接对粘粒阳性克隆进行部分序列测定及鉴定分析,结果进一步证明该阳性克隆含有不完全的人α-乳清白蛋白基因,其3端缺失,5端长约40kb,并绘出了该阳性克隆约10kb的片段物理图谱.PCR扩增出缺失的3端,然后构建成α-乳清白蛋白基因载体,并进行转基因小鼠试验,结果表明三只转基因小鼠奶样较对照奶样多出一条带,其分子量与人α-乳清白蛋白的分子量(14.2KDa)相当,初步估计其表达量为0.2~0.4mg/ml.
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