转pGH-IGF-1双基因猪阳性鉴定及外源基因差异表达的研究

来源 :青岛农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:longbatian911
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为探究外源猪生长激素基因(pGH)基因和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)基因表达量对 F1代转双基因代猪生长的影响,同时探索精子介导纳米载体法制备的转双基因猪在实际生产上是否稳定遗传。本试验选取转双基因猪所产的5窝 F1代猪为研究对象,检测仔猪阳性率。利用Real-time PCR法检测1月龄到6月龄时健康猪耳组织pGH和IGF-1 mRNA表达水平。同时测量1月龄到6月龄F1代猪体重并与所得两种基因在猪体中的不同表达量进行相关分析。结果表明:  1.本试验共获得53头F1代猪,其中48头活仔,3头死胎及2头木乃伊。采用PCR克隆和测序鉴定,其中17头为阳性猪,阳性率达到32.08%,证实了pG H-IGF-1双基因已经遗传至F1代猪中;经过X2检验分析,性别对转基因阳性率影响不显著(P>0.05)。  2.在5月龄时,转双基因猪表达量达到最大值,pGH、IGF-1基因分别为同窝非转基因猪1.98、2.00倍,均显著高于非转基因猪(P<0.05);在6月龄时,转双基因猪pGH、IGF-1基因表达量分别为同窝非转基因猪1.67、1.73倍,显著高于非转基因猪(P<0.05);其他月龄没有显著变化,但平均表达量均高于非转基因猪。  3.在全期的生长来看,转双基因猪个体平均重比非转基因猪提高3.85%,差异不显著(P>0.05);平均日增重提高3.98%,两者差异也不显著(P>0.05);在4到5月龄之间生长速度较快,育肥后期即6月龄依旧保持持续优势生长速度。  4.4月龄和5月龄时,转基因猪平均体长要高于非转基因猪,差异性显著(P<0.05);5月龄时,转基因猪平均胸围显著高于非转基因猪(P<0.05)。  5. Real-time PCR所测得外源基因表达量与F1代猪生长速度趋势基本相同,两者之间呈显著正相关,表明转双基因猪的生长发育与外源pGH基因和IGF-1基因表达量有着显著联系。
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