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目的：不安腿综合征(Restless Legs Syndrome, RLS)又称Ekbom综合症,为临床常见的神经系统感觉运动障碍性疾病,患者在夜间睡眠时或白天静息状态下出现双下肢难以形容的不适感,常被迫捶打或活动双腿或下床走动才能缓解。50%以上的RLS患者有阳性家族史。目前,已报道了6个RLS的连锁位点,分别命名为RLS1-6。全基因组关联分析共发现了四个基因的多态性与RLS相关,分别是BTBD9、Meis1、MAP2K5、LBXCOR1。2009年法国C.Vilario-Guell等用直接测序的方法在一个RLS家系中发现了Meisl p.R272H突变,这是世界上迄今为止报道的第一个RLS致病突变,但并未得到其它研究的重复证实。RLS与帕金森病(Parkinson Disease, PD)在病理生理学方面的联系近年来已得到人们的重视,两病在遗产学方面是否也存在相互联系呢2005年Susanna Adel等报道了一个RLS／PD大家系,在17名RLS患者中有8人发现了Parkin基因9号外显子或7号外显子的杂合突变。随后作者在一个小RLS／PD家系中进行验证,发现3名RLS患者中有2人同样存在Parkin基因7号外显子的缺失突变。这提示该Parkin突变并不是RLS的直接致病基因,但是这并不能排除Parkin突变可能是不安腿综合征发病的危险因素。2009年Irene Pichler等在9名原发性RLS患者中检测出Parkin基因7号外显子的杂合缺失突变,9名RLS患者来自于3个意大利家系。在此前的研究中,作者已确定上述3个RLS家系均与RLS4连锁。由于Parkin基因与RLS4临近,且同时出现RLS症状及Parkin突变的患者其发病年龄明显早于单纯RLS患者。因此作者推断Parkin基因对RLS4起修饰作用,并最终影响RLS患者的发病年龄。2009年4月我们采集到一个2代5人发病的不安腿综合征家系。其中第二代有两人在不安腿综合征发病1-2年后出现帕金森病症状,而他们的父亲存在姿势性震颤。由于我们收集到的家系与Susanna Adel等报道的家系具有相似的临床特点,即同是在一个原发性RLS家系中有数人同时患有帕金森病或疑似帕金森病,并有1或两人出现姿势性震颤。所以我们通过对此家系的先证者及他的一位正常同胞的Parkin基因的全部12个外显子进行了测序以验证了本家系是否同样存在parkin突变。同时我们对本家系第二代的一位RLS患者和一位正常人进行了Meis19号外显子测序,以验证本家系是否同样存在Meis19号外显子突变。此外,我们采用国际不安腿研究组制定的RLS严重程度评分量表(IRLSSGRS)对每位RLS患者的病情严重程度作出了评价,并采用统一的帕金森病评分量表(Unified Parkinson’s Disease Rating Scale, UPDRS)对两位PD患者的病情严重程度做出了评价,来比较存在Parkin突变的RLS患者与不存在Parkin突变的RLS患者其上述两项评分是否存在差异。材料和方法：本家系由山东大学齐鲁医院神经内科门诊收集,所有RLS患者均符合国际不安腿协会(IRLSSG)2003年制定的不安腿综合征诊断标准,所有PD患者均符合英国帕金森病协会PD诊断标准。家系12名成员的血液标本通过随访方式获得。Parkin基因及Meisl基因外显子序列由http://www. ensembl. org/index. html获得。Parkin基因测序引物参见Hao Deng的研究。Meisl基因外显子测序引物由C.Vilario-Guell提供。酚／氯仿法提取其基因组DNA,采用聚合酶链式反应(PCR)方法特异性扩增Parkin基因的全部12个外显子及Meisl基因的9号外显子。琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物,经分离纯化后通过DNA测序方法获得其序列,然后与正常序列进行对比分析。结果：1.我们检测了先证者及家系中第二代的一位正常人(家系成员Ⅱ9)的Parkin基因的全部12个外显子,未发现任何突变。仅在4号外显子发现了一个SNP(rs1801474)。2.我们检测了先证者及家系中第二代的一位正常人(家系成员Ⅱ9)的Meis1基因9号外显子,未发现任何突变及多态。结论：1.Parkin基因外显子突变不是本RLS／PD家系的致病突变,但是并不能排除Parkin基因突变是本家系发病的易患因素,因为并未对家系中所有RLS患者的Parkin基因进行测序。我们需要在有条件的情况下继续对本家系所有RLS患者Parkin基因进行测序以进一步验证Parkin基因突变是否是RLS／PD家系发病的易患因素。2.我们发现的Parkin基因4号外显子的一个SNP(rs1801474)与本家系的发病是否有关,需进一步验证。3.我们未在本家系中检测到Meisl基因9号外显子突变,C. Vilario-Guel1等报道的Meis1 p.R272H突变需要更多的独立研究进一步验证。