黄瓜细菌性角斑病菌（Pseudomonas syringae pv lachrymans）和黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus，CGMMV)是危害葫芦科作物的两种常见病原物，李属坏死环斑病毒(Prunus necrotic ringspot virus，PNRSV)、李痘病毒(Plum pox virus,PPV)是核果类果树的重要病原物。其中，黄瓜绿斑驳花叶病毒、李属坏死环斑病毒、李痘病毒是我国出入境检疫性有害生物。随着国内、国际贸易的迅猛发展，检疫性病原物进入我国的风险逐渐提高。基于此，本研究针对上述四种病原物，利用交叉引物恒温扩增检测技术和重组酶聚合酶等温扩增技术建立了快速准确的病原物检测方法，主要结果如下　　1、建立黄瓜细菌性角斑病菌交叉引物恒温扩增检测技术　　根据黄瓜细菌性角斑病菌的甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因，设计并筛选特异性引物，建立了黄瓜细菌性角斑病菌交叉引物恒温扩增检测技术，可区分黄瓜细菌性角斑病菌和13种常见的假单胞及其他菌属致病菌，检测限为054×103CFU/mL。　　2、建立黄瓜绿斑驳花叶病毒交叉引物恒温扩增检测技术　　根据黄瓜绿斑驳花叶病毒基因组中3端外壳蛋白基因序列，设计并筛选特异性引物，建立了黄瓜绿斑驳花叶病毒交叉引物恒温扩增检测技术，可区分黄瓜绿斑驳花叶病毒和其他5种葫芦科作物常见病毒（黄瓜花叶病毒、辣椒轻斑驳病毒、烟草花叶病毒、番茄花叶病毒、小西葫芦黄花叶病毒），检测限为243ng/μL总RNA。　　3、建立李属坏死环斑病毒交叉引物恒温扩增检测技术　　根据李属坏死环斑病毒外壳蛋白基因序列，设计并筛选特异性引物，建立了李属坏死环斑病毒交叉引物恒温扩展检测技术，可区分李属坏死环斑病毒和李属植物的其他常见病毒（李痘病毒、苹果花叶病毒、南芥菜花叶病毒）及类病毒（苹果锈果类病毒、桃潜隐花叶类病毒），检测限为72个拷贝。　　4、建立李痘病毒重组酶聚合酶恒温扩增检测技术　　根据李痘病毒全基因组中外壳蛋白基因序列设计并筛选特异性引物，建立了李痘病毒重组酶聚合酶恒温扩增检测技术，可以区分李痘病毒与其他3种马铃薯Y属病毒（马铃薯Y病毒、马铃薯A病毒、小西葫芦黄花叶病毒），以及常见的李属植物病毒（李属坏死环斑病毒、苹果花叶病毒、南芥菜花叶病毒）与类病毒（苹果锈果类病毒、桃潜隐花叶类病毒），检测限为053ng/μL总RNA。　　本研究基于两种恒温扩增技术，分别建立四种重要病原物的恒温扩增检测技术。这些检测方法可以在恒温条件下完成对目的核酸片段的扩增，具有快速、特异、灵敏度高、操作简单等优点，避免了常规检测方法需要昂贵仪器、费时等缺点，在口岸检疫和田间检测中具有重要应用价值，对于保护葫芦科和李属作物的生产具有重要意义。