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第一部分BLP耐受对人THP-1细胞TLR2及其下游信号转导和TNF-α表达的影响目的观察不同剂量细菌脂蛋白(BLP)刺激后,人单核细胞(THP-1)Toll样受体2(TLR2)、髓系分化因子88蛋白(MyD88)表达及肿瘤坏死因子(TNF-α)含量的变化。方法用小剂量BLP诱导THP-1产生耐受,再以大剂量BLP攻击,分别比较对照组、BLP耐受组、耐受后攻击组和直接攻击组TLR2、MyD88和TNF-α的表达。以Western Blot测定TLR2和MyD88蛋白含量。ELISA法测定TNF-α含量。结果BLP耐受组、耐受后攻击组和直接攻击组的TNF-α水平均高于对照组,而耐受后攻击组的TNF-α表达明显低于直接攻击组,各组间TLR2和MyD88蛋白含量无明显改变。结论BLP可刺激机体产生炎症因子,小剂量BLP诱导THP-1细胞产生BLP耐受,抑制细胞表达TNF-α,但不同剂量BLP对TLR2和MyD88的蛋白表达无影响。第二部分脓毒症对心脏功能的影响及BLP耐受的保护作用目的了解脓毒症对小鼠心脏功能的影响,观察细菌脂蛋白耐受对心功能的保护作用并研究其作用机制。方法成年雄性C57BL/6小鼠随机分为3组:假手术组、脓毒症组(剖腹手术行盲肠结扎穿孔致脓毒症)、BLP耐受+脓毒症组,以假手术组术前(0h)作为正常对照。分别在0h、2h、6h、12h四个时间点做小鼠二维超声心动图选择心率(HR)、左心室短轴缩短率(%FS)、射血分数(EF%)、心输出量(CO)等做为观测指标。Western blot测定心肌细胞TLR2蛋白表达,心肌匀浆测定细胞因子TNF-α浓度。心肌免疫组化观察心肌组织内巨噬细胞浸润情况。结果假手术组的HR、FS和EF自0h至6h呈持续上升趋势,术后6h达顶点(与0h相比p<0.05),此后下降,术后12h接近0h水平;CO自0h下降,2h时达最低(与0h相比p<0.05),此后回升,12h时接近0h水平。脓毒症组的HR、FS和EF术后短暂上升,2h后HR和FS有所下降,EF上升趋缓,6h时HR、FS和EF仍高于0h水平,但此后明显下降,至12h时降至低于0h水平;而CO自0h呈持续下降,至12h明显低于0h水平(p<0.05)。BLP耐受+脓毒症组0h至6h时段HR、FS、EF和CO的变化趋势与脓毒症组相同,但前者FS、EF和CO的值均低于脓毒症组(P<0.05);而6h后脓毒症组的4项指标继续下降,BLP耐受+脓毒症组转而上升,至12h时显著高于脓毒症组(P<0.05)。心肌细胞TLR2蛋白表达及心肌匀浆中TNF-α含量各组间无差异。心肌免疫组化显示,对照组及假手术组各时相均未见巨噬细胞浸润,脓毒症组12h时出现巨噬细胞浸润,BLP耐受+脓毒症组2h时见巨噬细胞浸润,6h及12h均未见巨噬细胞浸润。结论手术对心脏功能有抑制作用;脓毒症对心脏功能有明显抑制:BLP耐受具有心功能保护作用:脓毒症早期心功能的变化可能与心肌细胞内炎症反应无关。