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T细胞急性淋巴细胞白血病(T cell acute lymphoblastic leukemia,T-ALL)是一种严重威胁人类健康的血液系统恶性疾病。浸润是这类白血病复发的重要原因之一。细胞的迁移是发生浸润的关键步骤。CXCR4在T-ALL细胞表面的高表达与浸润和预后较差有关,但具体的作用机制有待深入研究。CXCR4与配体CXCL12结合可激活细胞内多种信号通路。本课题组的前期研究结果表明,CXCR4介导的JURKAT细胞迁移依赖于RhoA、RhoC及对细胞骨架的调控。在此基础上,本论文围绕RhoA和RhoC的上游信号分子,如RhoGDI2、SRC和LCK研究了CXCR4在T-ALL细胞迁移过程的作用机制。具体研究内容和结果如下:1.通过shRNA、细胞转染、Transwell等技术研究CXCR4和RhoGDI2在T-ALL细胞迁移过程中的作用。结果表明,干涉CXCR4和RhoGDI2分别抑制和促进了T-ALL细胞向CXCL12的迁移,说明RhoGDI2抑制了CXCR4介导的T-ALL细胞迁移;2.通过GST-Pulldown实验研究24、153和130位酪氨酸的磷酸化对RhoGDI2结合RhoA/RhoC能力的影响,通过Transwell实验研究上述位点的磷酸化对CXCR4介导的T-ALL细胞迁移的影响。结果显示,RhoGDI2的24和153位酪氨酸的磷酸化显著降低了RhoGDI2对RhoA和RhoC的结合能力。野生型RhoGDI2的过表达抑制了CXCR4介导的T-ALL向CXCL12的迁移。RhoGDI2的24和153位酪氨酸被磷酸化后,RhoGDI2对迁移过程的抑制被解除;3.通过siRNA、Western Blot和Transwell实验研究SRC和LCK对CXCR4介导的T-ALL细胞迁移的影响。结果表明,CXCR4介导的迁移依赖于SRC和LCK的活化,且RhoGDI2能够被活化的SRC磷酸化,提示SRC可能通过磷酸化RhoGDI2来参与T-ALL细胞迁移过程;本论文重点研究了RhoGDI2的磷酸化在CXCR4介导的白血病细胞迁移过程中的作用,阐明了CXCR4参与T-ALL细胞迁移的具体机制。本论文的完成将为治疗T-ALL白血病提供有效的作用靶点。