《酒白芍的炮制工艺、质量标准及其药效学研究》是来自于湖北省GAP重大炮制品牌项目。本课题是以中医药理论为指导,应用现代科学技术和方法,对中药白芍的炮制工艺进行了优化和验证,并对质量标准进行了系统的研究,制定了净白芍和酒白芍的质量标准,还对质量标准进行说明,以确保饮片的安全有效、稳定可控,同时对酒炙白芍的药效做了一定的考察和研究。1.文献综述的研究本文概述了白芍的炮制历史沿革及现代研究进展。对古今文献中所收载的与白芍炮制有关的内容,白芍炮制的起源、发展,炮制的现状及传统炮制理论等,进行了归纳、整理,以便为进一步研究白芍的炮制提供参考。经初步统计有近50部文献中均载有酒炒或有关酒制作用的论述。白芍味苦酸,性微寒,炒制后性缓、柔肝、止泻,酒炒后借酒行经止中寒腹痛。白芍的炮制方法,现行全国各地尚有“炒制”“酒制”“土制”“醋制”“麸制”“酒麸焯”“制炭”“煨制”“盐制”等制法;药典收载有白芍、炒白芍、酒白芍三种饮片规格的炮制方法。现代认为白芍经炒后,性稍缓,以养血敛阴为主,酒炙后,能降低酸寒之性,擅于和中缓急,止痛。现代文献研究结果表明,本品主要含有芍药苷、牡丹酚、芍药花苷等成分;具有镇静、解痉、抗炎、抗应急性溃疡病、扩张冠状动脉、对抗应急性心肌缺血以及抑制血小板聚集等多种药理作用。2.白芍炮制工艺的研究根据炮制的规范化研究要求,为了达到炮制的目的,增强白芍的临床疗效,采用白芍的道地药材,即安徽亳州GAP种植基地的白芍,从浸润切制、干燥、酒炙等炮制工艺进行了全程系统测定。筛选出了各个环节最佳炮制方法的量化数据,使白芍净制工艺及酒炙工艺更易推广到中药饮片产业化大生产中去。在炮制工艺方面,首先以水溶性浸出物含量,醇溶性浸出物含量,总灰分为考察指标,考察了最佳软化工艺和白芍最佳干燥工艺,最佳软化工艺确定:蒸法——加水稍微浸润(3-5h)后再蒸,同时在线即时切片。其次,在干燥工艺的研究中,白芍最佳干燥工艺确定:温度60℃,厚度2cm,平均干燥40min,中间翻动1次。另外又以白芍芍药苷为评价指标,考察了加酒量、酒炙温度和炒制时间对白芍酒炙工艺的影响,采用正交试验优选白芍的酒炙工艺。最终确定白芍酒炙工艺:加酒量5%,温度控制在90℃,炒制10min。3.质量标准的研究根据《中华人民共和国药典》2005年版对饮片的质量要求,结合净白芍、酒白芍的各种化学性质,从性状、鉴别、检查、含量测定等方面建立的全套饮片的质量标准。3.1在鉴别过程中,采用了显微鉴别,薄层鉴别。其中薄层层析法对黄酒炙白芍进行了鉴别。试验结果表明,供试品色谱中,在对照品或对照药材色谱相应的位置上,均显相同颜色的斑点,而阴性对照无干扰。经多次试验验证,斑点清晰、重复性好、专属性强,此方法的确立为白芍的定性鉴别提供了依据。另外还采用紫外谱线组法鉴别了净白芍和酒白芍,以谱线组的全部吸收峰数、峰位、峰形为鉴别依据该法比单一溶剂提取的紫外光谱鉴别特征性更强,具有取样量小、简便、快速、准确等特点。3.2建立了反相高效液相色谱法测定酒白芍中芍药苷含量的方法。该方法采用十八烷基键合硅胶为填充剂的色谱柱:C18(4.6*250mm,5um)Agilent;流动相∶乙腈-水为17∶83;检测波长:240nm;流速:1.0ml/min;柱温:25℃;理论踏板数按芍药苷计算不低于2000。结果表明:芍药苷在0.0604～0.8456μg(r=0.9995)范围内线性关系良好;加样回收率为99.49%,RSD为0.46%,为白芍饮片黄酒炙白芍的质量控制方法提供了定量依据。4.白芍酒炙前后药效变化比较研究主要选择了抗凝血、镇痛、抗炎和镇静实验,来研究白芍酒炙前后的药效学变化。①白芍抗凝血实验,表明生品与黄酒炙品均能明显延长小鼠出血时间,且黄酒炙品比生品作用更强,黄酒炙品的抗凝血作用强于生品。②白芍对小鼠热缩尾的影响实验表明生品与酒炙品均有镇痛作用,且镇痛作用黄酒炙品＞生品。③白芍对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响实验,说明生白芍与黄酒白芍均有一定的抗炎作用,但彼此间无显著性差异。④白芍对小鼠强迫游泳不动时间的影响实验,说明白芍水煎液有一定镇静作用,且黄酒白芍明显强于生白芍。