目的:一、使参芪五味子片和失眠调控密切相关的靶基因相互之间的关系相对明确化;二、解释与参芪五味子片有关的失眠调控的生物过程和信号途径;三、预测参芪五味子片活性成分的潜在的较为关键的失眠调控靶点;四、验证潜在的关键靶点与活性化合物结合相关细节,探索参芪五味子片对失眠大鼠的睡眠时间、脑组织结构、关键蛋白和mRNA水平的影响情况。方法:一、在TCMSP数据库中检索参芪五味子片各组分活性化合物和靶点,并在Genecard等数据库中检索失眠相关基因,预测出复方-疾病靶标基因（C-DTG）,利用Cytoscape软件分别构建草药-化合物-C-DTG网络（T-C-C网络）和蛋白质相互作用网络（PPI网络）,然后利用MCODE插件筛选出蛋白功能复合模组,联合失眠的相关性指数,预测潜在的关键基因;二、利用DAVID数据库对失眠相关靶基因和各蛋白复合功能模组进行KEGG和GO功能注释,并运用R软件进行可视化;三、利用SYBYL-X软件对关键蛋白进行模拟分子对接,并对受体-配体对接模型进行可视化;将45只大鼠随机分为空白组、模型组、参芪五味子片低剂量组、中剂量组、高剂量组,对每组大鼠进行戊巴比妥钠翻转试验、HE染色、western-blot实验和实时荧光定量PCR实验,分别检测各组睡眠持续时间、睡眠潜伏期、下丘脑组织结构表现、脑组织中关键蛋白和mRNA表达水平。结果:一、由4种草药组分、35个活性化合物和138个C-DTG构建成一个由173个节点和203条边组成的T-C-C网络。137个C-DTG构建成一个由137个节点和1602条边组成的PPI网络。结合分析三个蛋白复合功能模组和失眠相关性指数,预测出白介素6（IL6）,单胺氧化酶A（MAOA）,雌激素1（ESR1）和5羟色胺受体2（HTR2A）4个关键基因。二、C-DTG富集在与神经配体受体相互作用、炎症、凋亡和氧化应激等相关的109条KEGG信号通路上和过程中,在细胞膜、细胞质膜、突触间隙、线粒体及线粒体外膜等结构中广泛参与酶、药物、蛋白质等结合。三、模拟分子对接结果:ESR1 分别与 calycosin、formononetin、isorhamnetin、jaranol 结合,Total score 分别为 4.55、4.71、4.74 和 4.30 分,Cscore 分别为 4、3、4、4分。HTR2A 与 beta-sitosterol 结合、IL6 与 kadsulignan B 结合、MAOA 与Stigmasterol 结合,Total score 分别为 4.30、5.88、4.71、3.86 分,Cscore分别为5、4、3分。睡眠持续时间和潜伏期:与空白组相比,模型组睡眠时间显著减少（P＜0.01）和睡眠潜伏期显著增加（P＜0.01）,与模型组比较,中、高剂量组睡眠潜伏期显著减少（P＜0.05或P＜0.01）,低、中、高剂量组睡眠时间显著增加（P＜0.05或P＜0.01）。下丘脑组织结构:正常下丘脑组织细胞排列整齐、紧密、有序,细胞核无变形,胞浆均匀一致,核浆比例适中,细胞形态规则。模型组细胞排列紊乱,胞间距离不一致,大量细胞核变形、胞浆流失、细胞空洞化、泡沫化。参芪五味子片高中低剂量组的下丘脑组织胞核、胞浆、细胞形态学均有不同程度的改善,这种改善程度总体上表现为高剂量组＞中剂量组＞低剂量组。ESR1,IL6,MAOA和HTR2A蛋白相对表达水平:与空白组相比,模型组ESR1,IL6,MAOA和HTR2A的相对表达水平显著升高。与模型组相比,高剂量组ESR1,IL6,MAOA和HTR2A的相对表达水平的表达量显著降低（P＜0.01）,中剂量组ESR1,IL6和MAOA相对表达水平显著降低（P＜0.01）,低剂量组ESR1相对表达水平显著降低（P＜0.05）。IL6,MAOA,ESR1和HTR2A mRNA相对表达水平:与空白组相比,IL6,MAOA,ESR1和HTR2A的mRNA相对表达水平均显著增加。与模型组相比,高剂量IL6,MAOA,ESR1和HTR2A的mRNA相对表达水平显著降低（P＜0.01）,中剂量组IL6、MAOA和ESR1的mRNA相对表达水平显著降低（P＜0.01）,低剂量组IL6、MAOA和ESR1的mRNA相对表达水平显著降低（P＜0.05或 P＜0.01）。结论:参芪五味子片活性化合物通过作用于多种失眠相关靶点,包括调控ESR1,IL6,MAOA和HTR2A等关键靶点,作用于神经配体受体相互作用信号通路和炎症、氧化应激、凋亡等多种信号和反应过程,来改善失眠大鼠的失眠症。