【摘 要】
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[目 的]初步研究双氢青蒿素联合顺铂对膀胱癌细胞（T24/5637）周期、凋亡、侵袭和迁移能力的影响,探讨双氢青蒿素是否能增强顺铂对膀胱癌细胞的化疗敏感性。该研究能为膀胱癌化疗方案的理论研究提供新的思路,同时为临床上膀胱癌化疗方案的选择提供新的理论依据。[方 法]1.通过CCK8检测细胞增殖活性,细胞活力=（实验孔OD-空白组OD）/（对照组OD-空白组OD）%。设置DDP、DHA的浓度梯度,根据
【基金项目】
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昆医联合专项（202001AY070001-163）； 昆明医科大学研究生创新基金（2021S208）；
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[目 的]初步研究双氢青蒿素联合顺铂对膀胱癌细胞（T24/5637）周期、凋亡、侵袭和迁移能力的影响,探讨双氢青蒿素是否能增强顺铂对膀胱癌细胞的化疗敏感性。该研究能为膀胱癌化疗方案的理论研究提供新的思路,同时为临床上膀胱癌化疗方案的选择提供新的理论依据。[方 法]1.通过CCK8检测细胞增殖活性,细胞活力=（实验孔OD-空白组OD）/（对照组OD-空白组OD）%。设置DDP、DHA的浓度梯度,根据CCK8检测结果计算DHA、DDP在2种细胞中的IC50,作IC50曲线,根据筛选出的DHA、DDP浓度,设定DDP的浓度不变（2.5ug/ml）,与不同浓度的DHA联合作用于膀胱癌细胞（T24/5637）,在12h,24h,48h时间点CCK8检测细胞增殖活性,筛选出适合后续进行细胞周期、凋亡、侵袭、迁移实验的浓度。2.流式细胞仪检测膀胱癌细胞（T24/5637）周期和凋亡。3.划痕实验检测膀胱癌细胞迁移能力,24h为试验观测终点,倒置显微镜下明场拍照观察记录12h,24h划痕迁移面积（40倍视野）,通过Image J软件对各观察时间点的划痕面积进行计算分析。4.Transwell实验检测细胞侵袭能力,加入相应药物作用24h后100倍镜下观察拍照,随机选取3个视野,使用Image J软件进行细胞计数分析。[结 果]DDP对于5637细胞的IC50为18.19μg/ml,DHA对于5637细胞的 IC50约为 24.08μg/ml;DDP 对于 T24 细胞的 IC50 为 33.61μg/ml,DHA 对于T24细胞的IC50约为32.27μg/ml。DHA/DDP单独用药组阻滞G0/G1期作用弱于联合用药组（P＜0.05）。DHA联合DDP应用时导致T24、5637细胞凋亡率明显高于DHA/DDP单独应用（P＜0.05）;在24h时,两种细胞DHA组迁移面积百分比大于DDP+DHA组（P＜0.05）,DDP组迁移面积百分比大于DDP+DHA组（P＜0.05）。24h后DHA组抑制膀胱癌细胞穿膜作用弱于DDP+DHA组（p＜0.05）,DDP组抑制制膀胱癌细胞穿膜作用弱于DDP+DHA组（p＜0.001）。[结 论]DHA联合DDP可增强DDP抑制膀胱癌细胞增殖的作用,DHA可使顺铂诱导细胞凋亡率增加,DHA可增强DDP抑制膀胱癌细胞侵袭迁移能力。
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