bcl-2基因CpG岛甲基化对鸡与鹌鹑属间杂交种早期胚胎发育的影响

来源 :石河子大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mainoracle
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
【目的】鸡与鹌鹑属间杂交面临着受精率低和孵化率低等远缘杂交不亲和性,特别是杂交种早期胚胎大量死亡,严重影响鸡与鹌鹑属间杂交的推广应用。本研究在对鸡、鹌鹑及其杂交种胚胎样本进行性别鉴定的基础上,采用与细胞凋亡和增殖相关的bcl-2基因的启动子区CpG岛甲基化检测和荧光定量PCR验证的方法,对比分析bcl-2基因的甲基化程度和基因表达水平,以探讨bcl-2基因甲基化对鸡与鹌鹑属间杂交种早期胚胎死亡的影响作用。  【方法】  (1)用CHD基因分析鸡、鹌鹑及其杂交种性别比率采集鸡、鹌鹑及其杂交种胚胎胚龄为60h、66h、72h、84h、96h、108h、120h、132h、144h、156h、168h(7d)共11个时间点的胚胎组织样并提取基因组DNA,孵化杂交种蛋2465枚,采集胚胎样550枚(每个时间点采集50枚,共11个时间点),通过PCR的方法选择与性别分化相关的CHD基因进行性别鉴定。  (2)用MSP方法对鸡、鹌鹑及其杂交种胚胎组织中bcl-2基因进行甲基化程度检测。采用甲基化特异性PCR(MSP)方法对鸡、鹌鹑及其属间杂交种早期胚胎发育至60h、66h、72h、84h、96h、108h、120h、132h、144h、156h、168h11个不同胚龄胚胎组织bcl-2基因启动子区CpG岛甲基化状态进行检测与对比分析,用甲基化引物扩增出182bp的目的片段即判定为甲基化状态,而用非甲基化引物能扩增出片段长为181bp的目的条带就说明该bcl-2基因发生了非甲基化。  【结果】  (1)杂交种蛋孵化至60h时其受精率仅能达到13.7%;当母本朝鲜鹌鹑达到其产蛋高峰期时,受精率则有所提高,孵化至156h可达35.7%,总体的平均受精率为22.3%。  (2)鸡和鹌鹑胚胎的各时间点雌雄比均趋近于1:1,鸡胚和鹌鹑胚的总体雌性百分率为49.697%和52.424%,与之相对应的二者的总体雄性百分率为50.303%和47.576%,雌雄比平均值比分别约为1和1.04;而杂交种胚胎性别的鉴定结果则与鸡、鹌鹑明显不同,在胚胎发育至72h-168h时平均雄性百分率为72.5%,显然远高于雌性百分率27.5%,所有时间点上的总体雌雄比率为1:4,雌性胚胎枚数有明显差异。  (3)正常发育的鸡胚和鹌鹑胚龄在60h、66h、72h、120h大部分样本均呈高甲基化状态,鹌鹑胚胎在96h和108h鹌鹑胚为非甲基化状态,鸡胚在96h和108h仍然为甲基化状态;而鸡与鹌鹑属间杂交种胚胎在60h、66h、72h、96h、108h和120h则与鸡、鹌鹑明显不同,呈现出甲基化或非甲基化无规律性并存甚至于检测不到甲基化状态,但在84h则只检测到非甲基化状态。  【结论】  (1)杂交种早期胚胎的雌性胚胎在发育过程中出现性别分化异常而导致大批死亡。  (2)杂交种早期胚胎组织中bcl-2基因的甲基化呈异常状态,是影响胚胎发育进程和造成胚胎早期死亡的原因之一。
其他文献
1998年技术维护工作要点摘自'98全国广播电视技术维护工作会议文件编者按:1998年全国广播电视技术维护工作会议于4月22日至25日在江苏无锡召开。会议重要议题之一是全面总结了1997年全国广播电视技
从乾隆年间至今,河南豫剧已流传了250多年.这期间,中国变化剧烈,发展迅速,豫剧也同样经历、体现着这种历史的变化.
5月29日,河南中华豫剧文化促进会第一次会员代表大会在郑州举行,这是集结了我省豫剧界精英骨干和众多致力于戏曲事业的人们的一次盛会.在这样一个鼓舞人心的时刻,我不由得想
在社会主义市场经济条件下,如何根据有线电视的自身特点加强自办节目管理,实现良好的社会效益和经济效益,是摆在有线电视台面前的一个重要课题。一方面。有线电视与无线电视在管
与时俱进、开拓创新是党的十六大以来,对各条战线在社会主义建设新时期的总体要求.那么,不断发现问题,分别进行必要的社会调查,研究各自身边所存问题的解决方法,便成为实现这
中央电视台于2001年7月9日开办了戏曲频道,以播出地方戏优秀剧目为宗旨,为全国各地优秀的地方戏演员提供了阵地和平台,进一步丰富了央视的戏曲艺术资料,满足了广大戏曲专业工
2006年,yamanaka等人借助逆转录病毒将Oct4、Klf4、c-Myc和Sox2四个基因导入到小鼠胎儿成纤维细胞中,使其重编程为类似ES细胞的诱导多能干细胞(iPS细胞)。诱导多能干细胞在细胞
一、曲艺之乡马街书会曲艺是中华民族的优秀传统文化,它来自民间,服务大众,深受广大群众喜爱.河南宝丰马街书会和山东惠民的胡集书会并列我国北方两大书会.由于马街书会具有
EW—300L型采煤机为单滚筒无链牵引采煤机。采煤机的操作方式有远控、无线电遥控和手动跟机操作三种。三种操作方式以远控为主要操作方式,无线电遥控用于在工作面地质情况比
本期沪深两市继续保持单边下行的态势。沪市是以1207.05点创下了五年多来的新低,并诞生了中国A股市场的第一只仙股*ST达曼(600788)。两市的成交量持续低迷,两市成交额之和基