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目的:观察Ce6-PDT对人结肠癌SW480细胞、SW620细胞外泌体形态、粒径及分泌量的影响及外泌体在结肠癌上皮间质转化中的作用,为Ce6-PDT治疗结肠癌机制提供科学资料。方法:1.通过荧光倒置显微镜观察Ce6-PDT后两种细胞形态的变化;2.采用MTT法检测Ce6-PDT后两种细胞的生存抑制率;3.采用划痕实验检测细胞迁移能力;4.透射电子显微镜观察Ce6-PDT后两种细胞外泌体形态变化;5.纳米颗粒示踪分析Ce6-PDT后两种细胞外泌体浓度及粒径变化;6.Western Blot检测Ce6-PDT后两种细胞CD63、CD9、HSP70和Calnexin蛋白的表达情况;7.通过外泌体与细胞共孵育观察两种细胞增殖、迁移能力变化;8.Western Blot实验检测共孵育后两种细胞EMT相关蛋白Vimentin、E-cadherin的表达情况。结果:1.Ce6-PDT后,细胞形态发生明显改变,细胞变圆皱缩;随着Ce6浓度增加,细胞生长抑制率逐渐增加,差异有统计学意义(P<0.05);相比较对照组,在Ce6浓度为0.125、0.25、0.5μg/ml时,划痕面积无明显差异;在Ce6浓度为1.0μg/ml及更大浓度时,划痕面积更大;2.Ce6-PDT后,两种细胞外泌体成像均为典型的凹陷杯状结构;3.Ce6-PDT后,与对照组相比,两种细胞外泌体颗粒浓度减少(P<0.001);粒径范围均在50-200nm,颗粒平均直径无明显差异(P>0.05);4.CD63蛋白在外泌体中有表达,细胞中无表达;外泌体中CD9的表达量比对应的各组细胞中表达量高,经Ce6-PDT处理后外泌体CD9的表达量减少;细胞、外泌体中HSP70蛋白均有表达,表达量无明显差异;Calnexin蛋白在细胞中有表达,在外泌体中无表达;5.SW620细胞对照组及Ce6-PDT组外泌体均可促进两种细胞增殖(P<0.001);6.与未与外泌体孵育的细胞相比,两种细胞在加入未处理的SW620细胞外泌体共孵育后,划痕明显减小;两种细胞加入经Ce6-PDT处理的SW620细胞外泌体共孵育后,划痕面积没有明显差异;7.与未和外泌体孵育的细胞相比,两种细胞与SW620对照组细胞外泌体共孵育后,Vimentin蛋白表达明显提高(P<0.001),SW480细胞E-cadherin蛋白表达减少(P<0.001),SW620细胞E-cadherin蛋白表达没有明显改变(P>0.05);两种细胞与Ce6-PDT处理的SW620细胞分泌的外泌体共孵育后,Vimentin蛋白表达均没有明显改变(P>0.05),SW480细胞E-cadherin蛋白表达减少(P<0.05),SW620细胞E-cadherin蛋白表达没有明显改变(P>0.05)。结论:1.Ce6-PDT可导致SW480和SW620细胞形态发生改变,并且可抑制两种细胞的增殖活性和迁移能力;2.Ce6-PDT不会导致SW480和SW620细胞外泌体形态改变;3.Ce6-PDT对SW480和SW620细胞外泌体释放产生抑制作用,但不会使外泌体粒径发生改变;4.SW620细胞外泌体可促进SW480和SW620细胞增殖;5.SW620细胞外泌体可促进SW480和SW620细胞迁移,Ce6-PDT可抑制外泌体对两种细胞迁移的促进作用;6.SW620细胞外泌体可诱导SW480细胞发生EMT转变。