苏云金芽胞杆菌菌株CT-43产苏云金素及其缺失突变株的差异蛋白

来源 :华中农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lxkeinsun
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苏云金素(thuringiensin)是由苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis)某些菌株产生的一种热稳定的外毒素,它是一种核苷类似物,分子量701,它的作用机制是通过和ATP竞争酶的结合位点,从而抑制DNA依赖性RNA聚合酶的活性,所以具有广谱的杀虫活性。并且,苏云金素的毒性远低于大多数化学农药,所以它具有广谱杀虫剂的开发潜力。为了研究苏云金芽胞杆菌中苏云金素合成基因簇的代谢途径,利用双向电泳技术研究了苏云金芽胞杆菌高产苏云金素的野生菌株CT-43、其高产突变菌株CT-43-1C及不产突变菌株F-15在蛋白表达水平上的差异,通过软件分析并对差异蛋白点进行质谱鉴定,最后对鉴定出的蛋白进行生物信息学分析。与野生型菌株和高产菌株相比,在F-15中发现了13个差异显著的蛋白点,鉴定出了其中的9个,生物信息学结果显示有6个蛋白可能与苏云金素合成或代谢相关。其中,F-15菌株相对于高产菌株而言,二羟基丙酮激酶和N-乙酰葡糖胺-6-磷酸脱乙酰酶的缺失以及乌头酸水合酶1表达量的提高可能与苏云金素的代谢调控相关;UvrB/UvrCprotein表达量的降低可能与苏云金素的分泌途径相关;另外还发现phoH protein的缺失,可能与苏云金素合成途径中含磷的代谢中间物以及代谢能量相关;而亮氨酸-tRNA合成酶的含量的降低,导致突变菌株的生理代谢水平降低,从而可能影响到苏云金素的合成。本文通过蛋白质组研究找到了6个可能与苏云金素合成或代谢相关的蛋白,为苏云金素合成基因簇的克隆和合成途径的验证提供了有力的证据。
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