藠头提取物抗肿瘤及对氟尿嘧啶增效减毒作用的研究

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宫颈癌、胃癌的发病率高并难以治疗,在其肿瘤化疗过程中,抗癌药物在杀伤肿瘤细胞的同时,对正常免疫细胞也有杀伤作用,严重影响化疗的疗效。因此,急需寻找新型高效低毒的抗癌药物。药用植物具有增加化疗药物敏感性,减少化疗药物毒性的特点,因此对药用植物的研究与应用就显得极其重要。本文探讨了藠头提取物对人宫颈癌Hela细胞、人胃癌BGC-823细胞体外生长的抑制,藠头提取物增强5-FU对Hela细胞、BGC-823细胞的杀伤,以及对5-FU所致小鼠免疫功能抑制的保护作用,并通过质谱法比较藠头提取物作用细胞后蛋白质表达的差异,分析其增效减毒的作用机理。MTT法检测藠头提取物、藠头提取物和5-FU联合用药对Hela细胞和BGC-823细胞的抑制,荧光显微镜观察凋亡细胞的形态,DNAladder观测凋亡细胞的DNA片段化。结果表明藠头提取物对Hela和BGC-823两种细胞的生长均有明显的抑制作用,且呈浓度依赖性。藠头提取物与5-FU联合用药作用肿瘤细胞48h后,对Hela细胞的抑制率和对BGC-823细胞的抑制率均高于单独应用相同剂量两种药物中的任何一种,有显著性差异(p<0.05)。显微镜下观察到AO/EB的荧光核染后凋亡的细胞,琼脂糖凝胶电泳出现DNA的片段化,藠头提取物能有效地诱导BGC-823细胞和Hela细胞凋亡。Balb/c七周大雌性小鼠,随机分为高、中、低浓度藠头提取物组,不同浓度藠头提取物和5-FU联合用药组。小鼠每天腹腔注射一次,连续7天。测定各组小鼠免疫器官、腹腔巨噬细胞吞噬功能及淋巴细胞活性。结果表明100μL和150μL藠头提取物对免疫器官,非特异性免疫细胞和特异性免疫细胞的功能有显著性增强作用。中剂量和高剂量联合用药组能明显拮抗5-FU所致体重减少、腹腔巨噬细胞吞噬功能及淋巴细胞活性降低等毒副作用。提取药物作用48h后的肿瘤细胞总蛋白,经过SDS-PAGE、质谱检测差异蛋白条带,发现正常肿瘤细胞表达缺失,藠头提取物作用肿瘤细胞后表达的蛋白质Prohibitin-2、Rho-GTPase-activating-protein4,说明藠头提取物对5-FU的增效减毒作用与p53诱导细胞凋亡程序的启动和G1/S期的调控都有着密切的关系,其分子作用机制需进一步研究探讨。
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