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恶性肿瘤是目前乃至未来病死率较高的病种之一,据世界卫生组织发布的《2014世界癌症报告》显示,2012年全球有820万人死于癌症。对肿瘤标志物的检测有利于实现癌症的早期诊断,从而提高治疗效率,降低死亡率。肿瘤标志物的检测方法多种多样,以免疫层析法最为受到关注。免疫层析技术因其简便、经济、低样品量、无需专业人员操作、可实现床旁快速检测等特点而迅速发展。但以胶体金为代表的免疫层析试纸条灵敏度不高,进行多组分分析时需要多个检测带,且以定性检测为主,无法满足对多种肿瘤标志物的早期同步定量检测需求。免疫层析法所采用的标记材料对免疫传感器的性能起决定性的作用。荧光量子点(QDs)具有荧光强度高、光化学稳定性好、吸收光谱连续、发射光谱窄而对等特性,可实现“一元激发,多元发射”。基于QDs的优势,针对目前免疫层析产品的不足,我们提出以多色QDs作荧光标记物,开发一种基于多色QDs标记的生物传感膜,以实现对多种肿瘤标志物的快速、同步、定量检测。本文以1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)为偶联剂,制备546nm CdSe/ZnS QDs-抗甲胎蛋白单抗(QDs546-anti-AFP McAb)和620nm CdSe/ZnS QDs-抗癌胚抗原单抗(QDs620-anti-CEA McAb)偶联物。将两种偶联物按一定比例混合喷涂于结合垫上,鼠源甲胎蛋白单抗(anti-AFP McAb)和鼠源癌胚抗原单抗(anti-CEA McAb)混合物以及羊抗鼠IgG分别包被于硝酸纤维素膜(NC膜)上作为检测带(T带)和质控带(C带),在此基础上制作多色QDs生物传感膜。通过荧光阅读仪检测传感膜上T带和C带的荧光强度,计算出T带和C带的比值(T/C),对应相应的样品浓度绘制出标准曲线,即可达到定量检测的目的。在最优实验条件下,本课题组所开发的多色QDs生物传感膜对AFP和CEA的检测限分别为2 ng?ml和1 ng?ml,且无明显交叉反应,灵敏度、特异性高,样品恢复率好,批内稳定性好,批间差异小。本文将多色QDs与免疫层析技术相结合开发出的生物传感膜,NC膜上只需一条T带和一条C带便可实现对多种肿瘤标志物同步定量检测。其使用方便简单,无需专业人员操作,可在社区、家庭使用,并有利于将来检测仪器的小型化和智能化。