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河豚毒素(Tetrodotoxin,简称TTX)是一种剧毒的海洋生物毒素,其微量制剂具有很好的局部麻醉和镇痛效果。河豚鱼中广泛分布河豚毒素,是一种珍稀的海洋药物资源。我国东南沿海河豚鱼资源丰富,毒性分布相当复杂。目前,除个别品种的低毒部位用于加工出口外,高毒品种和生产过程中剔除的高毒部位大量废弃,既造成了资源浪费,也带来了一定的环境污染。本文调查了东南沿海常见河豚鱼的毒性分布情况,对TTX的超声辅助提取和柱层析纯化工艺进行了系统的研究,旨在寻找一种高效、低廉、可操作性强的生产方法,研究结果如下：1、通过形态学特征对福建、广东沿海采集的132条河豚鱼进行品种鉴定,并采用小鼠生物试验法和酶联免疫检测法研究其毒性分布。结果表明：采集的河豚鱼共12种,主要为腹刺纯属和东方纯属,其中腹刺纯属是主导鱼类,占总样本量的75.8%；TTX在河豚鱼种和鱼体不同部位间的分布差异极显著,主要集中在卵巢和肝脏,皮和肌肉多数为无毒或弱毒,而月腹刺纯全鱼有毒,卵巢毒力高达251.4MU,是最佳的提毒原料。2、采用L9(34)正交试验和响应面分析法对传统水浴法和超声辅助法提取月腹刺纯卵巢TTX的工艺条件进行了优化和比较,结果表明：以0.1%的乙酸为提取溶剂,液料比4：1,80℃水浴下提取2次(10min/次),月腹刺纯卵巢TTX的得率为50.23μg/g；液料比3：1,超声频率40kHz,功率40W,40℃水浴下提取1次(22mmin/次),月腹刺纯卵巢TTX的得率为63.57μg/g,比传统水浴提取法提高26.6%。3、以超声辅助法提取的TTX粗提液为原料,.对D152离子交换树脂、颗粒活性炭和Bio-Gel P2凝胶柱层析依次纯化TTX工艺进行了研究。结果表明：TTX粗提液在pH5.0、上样流速6mL/min的D152树脂吸附条件下,以洗脱流速1.8BV/h、洗脱体积7BV的2%乙酸洗脱效果最佳,回收率高达98.4%,纯度为0.33%；树脂纯化液在pH7.0、上样量50mL、上样流速2mL/min的活性炭吸附条件下以洗脱流速6.0BV/h、洗脱体积8BV的1%～5%的乙酸进行梯度洗脱效果最佳,回收率为92.5%,纯度为4.93%；活性炭纯化液在pH7.0、上样量4.0mL、上样浓度450μg/mL的凝胶层析条件下,以洗脱流速6.0BV/h、洗脱体积1BV的纯水和2BV的1%乙酸分步洗脱效果较佳,回收率为89.4%,纯度为46.6%。TTX粗提液经三步柱层析纯化后,总回收率为81.4%,纯度由0.01%提高到46.6%,杂质蛋白、总糖脱除率分别为99.7%、99.8%,脂肪及色素已完全脱除。