毛囊是皮肤重要而复杂的附属器官,是一个由上皮细胞和间充质细胞相互作用形成的单位,从内向外依次由毛干、内根鞘和外根鞘组成。除外根鞘外,毛干、内根鞘都是由毛母质(matrix)细胞分化而来的。毛母质是位于毛囊底部的一个增殖区,包绕毛乳头,毛母质细胞由毛囊干细胞分化而来的,具有高度的增殖潜能和一定的自我更新能力。毛囊发育和生长受众多信号通路共同调控,其中Wnt信号通路发挥关键作用。已有研究表明,Wnt信号通路在毛囊的发育,干细胞的维持和激活,毛干的分化,以及在人和鼠毛母质瘤的形成中都扮演重要角色。Wnt10b是Wnt家族中重要成员之一,研究表明Wnt10b在多种生物学作用如脂肪生成、骨生成、肿瘤发生和体轴的决定等方面都发挥重要作用。近来研究发现Wnt10b在触须和体毛的胚胎发育过程中表达于毛囊上皮细胞中,可启动并促进毛囊的发育。然而至今为止关于Wnt10b在出生后毛囊的表达规律以及其相关作用的研究报道还比较缺乏,有待我们的探讨。本课题采用了逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)和免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)技术检测了Wnt10b在小鼠毛囊周期中mRNA与蛋白质的表达,扩增并纯化了Wnt10b重组腺病毒,应用其表达的Wnt10b蛋白来干预体外培养的触须毛囊,初步探索了Wnt10b与毛囊周期性生长的关系和可能的作用,主要结果如下:1、首次发现Wnt10b在小鼠毛囊中的表达具有规律性和特异性,在第一周期特异性表达于生长期毛囊的毛母质部位,生长中期表达最强,生长早期和末期表达较弱,在毛囊的其他细胞中没有表达;退化期和静止期在整个毛囊都不表达;第二周期生长早期表达于次级毛芽。Ki67在毛母质中的表达变化规律以及在毛母质中的表达部位与Wnt10b具有一致性。2、我们对Wnt10b重组腺病毒进行了逐级扩增并应用氯化铯超高速密度梯度离心法纯化,病毒最终滴度达到109 PFU/ml;3、首次发现加入Wnt10b重组腺病毒可明显促进体外器官培养的触须毛囊毛干和内根鞘生长,这与本课题组在在体动物实验中发现的现象一致。