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目的:从全球范围来看,肺癌是发病率和死亡率最高的肿瘤,非小细胞肺癌是肺癌最常见的类型,约占它总数的85%,对人类健康造成很大的威胁。SLC1A5谷氨酰胺转运体是位于细胞膜上的一种跨膜糖蛋白,功能是将胞外的谷氨酰胺转运进入细胞内,为细胞的代谢提供底物,在包括非小细胞肺癌在内的很多癌细胞中高表达。癌细胞非常依赖谷氨酰胺,以维持癌细胞的生长和增殖。此前有文献报道,SLC1A5能影响非小细胞肺癌的生长与存活。而进一步的临床研究也显示,SLC1A5的表达是肺腺癌预后的一个重要指标,在EGFR无突变的患者中,它的表达水平越高说明预后效果越差。也有文献报道,SLC1A5与EGFR之间存在相互作用,但其作用机制及下游信号通路并不清楚。本课题将进一步研究SLC1A5在突变型和野生型EGFR非小细胞肺癌中的功能,探讨非小细胞肺癌中SLC1A5与EGFR的关系,SLC1A5功能与EGFR突变的相关性,以及其中的分子机制。方法:(1)选择六株非小细胞肺癌细胞(HCC827,HCC827ER,PC-9,NCI-H1975,A549和H358)作为研究对象,其中HCC827,HCC827ER,PC-9和NCI-H1975细胞是携带有EGFR突变的癌细胞,A549和H358是野生型EGFR癌细胞。(2)用Western blot检测不同条件处理下的SLC1A5蛋白水平。(3)加SLC1A5抑制剂GPNA处理,检测非小细胞肺癌的生长情况,及相关通路蛋白水平的变化。(4)干扰SLC1A5,检测非小细胞肺癌的生长情况,及相关通路蛋白水平的变化。结论:(1)SLC1A5蛋白水平在耐药细胞中上调;(2)SLC1A5抑制剂GPNA逆转HCC827ER细胞的耐药性,且作用强于谷氨酰胺酶抑制剂968;(3)耐药细胞NCI-1975对SLC1A5转运体的依赖程度显著小于HCC827ER细胞;(4)SLC1A5蛋白表达水平在野生型EGFR细胞中明显高于突变型;(5)siRNA干扰SLC1A5后对野生型细胞株生长无影响,但对HCC827ER耐药细胞生长的抑制作用依然显著;(6)SLC1A5与野生型EGFR没有相互作用,与突变型存在相互作用。