骨髓基质细胞迁移机制的体外实验研究

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目的:观察体外条件下趋化因子CXCL-8、CXCL-16对大鼠骨髓基质细胞迁移的趋化作用。方法:采用全骨髓法培养成年Wistar大鼠骨髓基质细胞,取第5代骨髓基质细胞行流式细胞仪鉴定;然后通过细胞免疫荧光及RT-PCR的方法检测骨髓基质细胞表达趋化因子受体CXCR1、CXCR6的情况,利用Transwell小室法探讨趋化因子CXCL-8、CXCL-16对骨髓基质细胞的体外趋化作用及其特异性。结果:第5代骨髓基质细胞的表面抗原CD29的阳性率为99.18%,CD45的阳性率为4.35%;骨髓基质细胞趋化因子受体CXCR1和CXCR6呈阳性表达,位于细胞膜和细胞浆中,RT-PCR琼脂糖凝胶电泳后分别出现215 bp、342bp特异性扩增条带。与对照组比较,加入5~500 ng/ml趋化因子CXCL-8或CXCL-16后,骨髓基质细胞迁移数均明显增加(P<0.05)。加入抗CXCR1或CXCR6多克隆抗体后,骨髓基质细胞迁移数较250 ng/ml趋化因子CXCL-8和CXCL-16组明显减少(P<0.05)。结论:体外条件下趋化因子CXCL-8、CXCL-16在5~500 ng/ml质量浓度范围可趋化骨髓基质细胞迁移,封闭趋化因子受体CXCR1或CXCR6后其趋化迁移作用明显减弱。CXCL-8\CXCR1和CXCL-16\CXCR6通路参与骨髓基质细胞体外迁移,为进一步研究骨髓基质细胞的迁移机制提供了理论依据。
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