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目的:肝纤维化是一种可逆转的创伤性修复,细胞外基质在肝脏中积累;肝脏内细胞外基质主要由活化的肝星状细胞产生,在肝纤维化发生发展中发挥不可忽视作用。前期我们已证实,缺氧诱导因子-1（Hif-1）通过调节自噬影响肝星状细胞的活化,但具体机制尚未明确。本文旨在探究Hif-1如何调控自噬而影响肝纤维化的发生发展,并从表观遗传学的角度如组蛋白甲基化修饰的角度探讨Hif-1对肝星状细胞自噬和活化的调控机制,进一步研究肝纤维化发生发展机制,为逆转肝纤维化提供科学的理论依据。方法:以常氧或100μM CoCl2缺氧诱导处理人肝星状细胞LX-2后,提取两组样品总RNA,逆转录成cDNA后,进行全基因组表达芯片分析,筛选自噬或组蛋白甲基化修饰相关基因,并用Western blot验证表达。以常氧或CoCl2缺氧诱导处理人肝星状细胞LX-2,用Western blot和免疫共沉淀技术（Co-Immunoprecipitation,Co-IP）检测Hif-1与组蛋白甲基化修饰H3K4me3的关系。继而用自噬抑制剂LY294002和氯喹（chloroquine）抑制LX-2内细胞自噬或者用H3K4me3抑制剂（methylthioadenosine,MTA）抑制细胞内组蛋白甲基化修饰,采用Western blot、免疫荧光技术（Immunofluorescence,IF）检测检测F-actin重排,Hif-1、OGT、H3K4me3、自噬标记分子LC-3B和自噬相关蛋白BNIP3、肝星状细胞活化标志Vimentin和α-SMA的表达。结果:对常氧组和缺氧诱导组LX-2肝星状细胞进行全基因组表达芯片分析,得到51个差异基因,如与自噬有密切关系的bnip3基因和参与H3K4me3甲基化修饰调控的ogt基因,通过Western blot检测到缺氧诱导后LX-2肝星状细胞内BNIP3蛋白和OGT蛋白表达显著增多,与全基因组表达芯片结果一致。LX-2细胞缺氧处理后,Western blot显示Hif-1与H3K4me3表达随时间延长而增多,免疫共沉淀技术证实Hif-1入核后形成的转录复合体中包含H3K4me3,提示组蛋白甲基化修饰参与Hif-1信号通路活化。用H3K4me3抑制剂抑制H3K4me3甲基化修饰,缺氧诱导的LX-2肝星状细胞内自噬标记分子LC-3B和肝星状细胞活化标志分子α-SMA以及Vimentin表达明显受到抑制,细胞骨架重排减弱。自噬抑制剂氯喹、LY294002抑制LX-2肝星状细胞自噬后,缺氧诱导的细胞内OGT蛋白表达和H3K4me3甲基化修饰增加均受到抑制。结论:参与细胞自噬的BNIP3蛋白以及调控组蛋白H3K4me3甲基化修饰的OGT蛋白在缺氧的LX-2肝星状细胞内表达增多;缺氧的LX-2肝星状细胞内入核形成的Hif-1转录复合物中存在H3K4me3甲基化;在缺氧微环境中,Hif-1作为主导的转录调控因子通过组蛋白甲基化修饰与自噬共同调节肝星状细胞的活化。