论文部分内容阅读
目的:
观察脱细胞猪真皮基质同种异体移植修复气管粘膜缺损的愈合过程,研究脱细胞猪真皮基质促进气管纤毛上皮修复、抑制瘢痕形成的机制,探讨研究治疗气管瘢痕性狭窄的新方法.
方法:
1.手术方法
小型猪14只。按同性别、同窝、体重相近的两只动物配成一对,随机分配到实验组及对照组,即单纯硅胶管压迫组和猪皮基质修复+硅胶管压迫组。进行随即化配对实验研究。
实验组:切开气管前壁,刮除3cm环形气管粘膜,用脱细胞猪真皮基质覆盖,内置支架固定。
对照组:切开气管前壁,刮除3cm环形气管粘膜,创面不予处理,直接用内置支架固定。
术后3天、7天、14天、1月、2月、4月、6月各处死1对动物进行观察。
2.术后观察
2.1大体观察
观察动物术后呼吸、进食情况、存活状况。处死动物后取材观察气管形状、管腔直径、移植物的存活情况、与组织粘连情况;气管内壁粘膜化程度,光滑程度,肉芽生长情况。
2.2组织学观察
常规HE染色:观察了解管壁移植物的存活情况,术后早期粘膜愈合过程,粘膜下层炎症反应程度,胶原排列,组成。
Ⅰ、Ⅲ型胶原天狼猩红染色:对两组动物Ⅰ、Ⅲ型胶原半定量统计分析。
2.3免疫组化
行T细胞、巨噬细胞,纤维连接蛋白免疫组化,对两组动物粘膜下层炎症反应、纤维连接蛋白的表达进行半定量统计分析。
2.4透视电镜观察
观察纤毛细胞、成纤维细胞的生物活性、合成代谢。
2.5统计学分析
统计在SPSS11.0软件下完成。
结果:
除1只动物因并发软骨膜炎致脱管死亡外,其他动物均成活到预期的时间。采用脱细胞猪真皮基质同种异体移植后,气管粘膜创面愈合时间明显缩短,一个月内被假复层纤毛上皮完全覆盖,6个月观察期内无瘢痕增生。粘膜固有层中炎症反应较轻,细胞外基质排列较规则,T细胞、巨噬细胞计数,纤维连接蛋白、Ⅰ、Ⅲ型胶原半定量统计与对照组有显著差别。
结论:
1.脱细胞(猪)真皮基质能有效促进气管粘膜上皮缺损的修复,并能有效避免瘢痕的形成。是一种修复气管粘膜缺损,治疗喉气管狭窄的理想材料。
2.脱细胞(猪)真皮基质抑制瘢痕形成的机制可能是通过抑制炎症细胞浸润、指导细胞外基质合成代谢来实现的。