论文部分内容阅读
目的：通过c-myc反义寡核苷酸转染QBC-939细胞株，探讨c-myc反义寡核苷酸对QBC-939细胞株细胞周期、凋亡、及化疗敏感性的影响，为研究胆管癌的治疗提供新的思路。方法：1．常规培养胆管癌细胞株QBC-939。2．合成特异性靶向c-myc反义寡核苷酸(ASOON)。3．将QBC-939接种于六孔培养板内，分为8组：①空白对照组，不加任何干预措施；②脂质体转染对照组，仅以空白脂质体转染；③5umol／L SODN转染组，转染c-myc正义寡核苷酸，浓度为5umol／L；④10umol／L SODN转染组，浓度为10umol／L，⑤15umol／L SODN转染组，浓度为15umol／L；⑥5umol／L ASODN转染组，转染c-myc反义寡核苷酸，浓度为5umol／L；⑦10umol／L ASODN转染组，浓度为10umol／L；⑧15umol／L ASODN转染组，浓度为15umol／L。作用72小时后收集各组细胞，并进行后续实验。4．免疫组化法检测各组细胞c-myc蛋白表达变化；流式细胞仪检测各组细胞的周期分布和凋亡率；MTT法检测5-Fu(1ug／ul)对各组细胞的生长抑制率。结果：1．各浓度反义寡核苷酸组细胞c-myc蛋白表达减弱，各浓度正义寡核苷酸组和脂质体对照组与空白对照组间比较无显著性差异(P＞0.05)。2．各浓度反义寡核苷酸组G1期细胞增多、S期细胞减少，各浓度正义寡核苷酸组和脂质体对照组与空白对照组间比较无显著性差异(P＞0.05)。3．各浓度反义寡核苷酸组细胞凋亡率增高，各浓度正义寡核苷酸组和脂质体对照组与空白对照组间比较无显著性差异(P＞0.05)。4．等浓度化疗药物5-Fu对各浓度反义寡核苷酸组细胞的抑制率增高，各浓度正义寡核苷酸组和脂质体对照组与空白对照组间比较无显著性差异(P＞0.05)。结论：c-myc反义寡核苷酸转染可下调c-myc蛋白的表达，阻止细胞由G1期进入S期，诱导细胞凋亡，增加胆管癌细胞对化疗药物的敏感性，其作用途径可能涉及抑制c-myc基因表达，诱导凋亡。