【摘 要】
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目的 通过检测慢性牙周炎患者病变部位与非病变部位以及牙周健康者龈下菌斑中牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)的毒力因子——精氨酸-牙龈素B(arginin
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目的 通过检测慢性牙周炎患者病变部位与非病变部位以及牙周健康者龈下菌斑中牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)的毒力因子——精氨酸-牙龈素B(arginine-gingipain B,RgpB)的基因多态性,探讨不同P.gingivalis基因型在慢性牙周炎发生发展中所起的作用,为牙周病致病机制的研究提供有益的参考。 材料与方法 1.研究对象的选择:实验组选择慢性牙周炎者42例,对照组选择牙周健康,年龄,性别与实验组具可比性者20例。所有受试者均无全身系统性疾病,未接受牙周系统治疗,近3个月未服用抗生素,无吸烟史,知情同意。 2.记录牙周指数:所有检查内容均由同一检查者完成。选择牙周炎患者口腔中病变较重的部位与健康或仅存在轻度龈炎的部位和牙周健康者的健康部位,记录探诊出血指数(Bleeding on Probing,BOP),牙周探诊深度(Probing Depth,PD),临床附着丧失(Clinical Attachment Loss,CAL)及牙齿松动度(Tooth Movement,TM)。 3.样本采集及细菌培养:用无菌牙签取被检牙位龈下菌斑,一份置于1ml的PBS缓冲液中,-70℃保存待检,另一份置于转送液(TD液)中10倍系列稀释后立即接种于BHI培养基上培养,经分离、传代、增菌、生化鉴定后收集菌体。 4.P.gingivalis的检测:酚-氯仿法提取DNA,用P.gingivalis 16S rRNA特异引物PCR扩增,1.5%琼脂糖凝胶电泳检测。 5.rgpB基因多态性的检测:设计引物对编码rgpB催化域的基因(rgpB
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