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前言 越来越多的研究表明，肿瘤的发生发展和细胞凋亡有密切关系，细胞凋亡受精细调控。目前认为，细胞内所发生的与凋亡有关的一系列有序的级联反应，关键是激活了一组被称为Caspase的蛋白酶。Caspase-3是凋亡级联反应的最终效应蛋白，在凋亡研究中倍受关注。 凋亡抑制蛋白(IAP)是抑制细胞凋亡的重要成份，Survivin是最近新发现的一种IAP。Survivin可能通过直接抑制凋亡终末效应器Caspase-3和Caspase-7的活性阻断各种刺激诱导的细胞凋亡过程。 本实验应用原位杂交(in-situ hybridization，ISH)技术检测凋亡终末效应器Caspase-3 mRNA和凋亡抑制蛋白Survivin mRNA在卵巢上皮性癌组织中的表达，探讨Survivin mRNA和Caspase-3 mRNA在卵巢癌发生发展中的作用及二者的相互作用关系。 材料与方法 1 临床资料 选择中国医科大学附属第一医院1998年1月至2003年5月存档蜡块。上皮性卵巢癌60例，其中卵巢浆液性囊腺癌43例，卵巢粘液性囊腺癌11例，卵巢子宫内膜样癌6例；根据国际妇产科联盟FIGO分期，Ⅰ期10例，Ⅱ期9例，Ⅲ期38例，Ⅳ期3例；组织学分级，高分化G 15例，中分化G2 19例，低分化G3 26例；患者年龄22--80岁，平均年龄51岁，选择同期卵巢上皮性交界性肿瘤10例，其中卵巢交界性浆液性囊腺瘤6例，交界性粘液性囊腺瘤4例，良性卵巢肿瘤10例，其中浆液性囊腺瘤5例，粘液性囊腺瘤5例及同时期手术中因其它良性疾病而切除的正常卵巢组织10例，作为对照。 2方法Soivin mRNA及Caspase一3 mRNA检测，均应用原位杂交技术进行检测。原位杂交试剂盒购于武汉博士德公司。 实验过程严格按照操作规范进行，Survivin mRNA及caspase一3 mR-NA的细胞胞浆着色呈棕黄色为阳性。通过不加探针作阴性对照。用阳性对照片做阳性对照。 3结果判定 400倍光镜下观察每张切片，经数码像机采样，输人MetaMorph ImagerSystem versinn4·6，将阳性细胞的染色强度变量化指标，计算其平均光密度(opital density，OD)值 4统计学处理 Stirvivin mRNA、Caspase一3 mRNA平均光密度(opital density，OD)值用x土s表示，两组间比较采用t检验，P<0.05为差异有显著意义。Sur-vivin mRNA和Caspase一3 mRNA平均光密度(opital density，OD)值进行相关分析。结果 1 CasPase一3 mRNA在正常卵巢组织、良性卵巢肿瘤、卵巢上皮性交界性肿瘤、卵巢上皮性癌中的表达。 正常卵巢组织、良性卵巢肿瘤组织中可见较多胞浆内有黄色颗粒的CasPase一3 mRNA阳性表达，卵巢上皮性交界性肿瘤、卵巢上皮性癌中的CasPase一3 mRNA阳性表达较少甚至不表达，比较平均光密度值，卵巢上皮性癌与正常卵巢组织相比，OD值降低，P<0.01，差别有显著意义。卵巢上皮性癌与良性卵巢肿瘤相比，OD值降低，P<0.01，差别有显著意义。卵巢上皮性癌与卵巢上皮性交界性肿瘤相比，OD值降低，P<0.05，差别有显著意义。卵巢上皮性交界性肿瘤与正常卵巢组织相比，OD值降低，P<0.05，差别有显著意义。卵巢上皮性交界性肿瘤与良性卵巢肿瘤相比，OD值降低，P<0.05，差别有显著意义。良性卵巢肿瘤与正常卵巢组织相比，差别无显著意义。111、W期卵巢癌与I、n期卵巢癌相比，OD值降低，P<0.05，差别有显著意义。在高、中、低分化的卵巢癌中差别无显著意义。在卵巢癌各组织类型中其差别无显著意义。 2 Survivi平mRNA在正常卵巢组织、卵巢上皮性交界性肿瘤、卵巢上皮性癌中的表达。 卵巢上皮性癌及卵巢上皮性交界性肿瘤中可见较多胞浆内有黄色颗粒的Survivin mRNA阳性表达，正常卵巢组织未见Stirvivin mRNA阳性表达，良性卵巢肿瘤仅1例见胞浆内有黄色颗粒。比较平均光密度值，卵巢上皮性癌与正常卵巢组织相比，OD值升高，P<0.01，差别有显著意义。卵巢上皮性癌与良性卵巢肿瘤相比，OD值升高，P<0. 01，差别有显著意义。卵巢上皮性癌与卵巢上皮性交界性肿瘤相比，OD值升高，P<0.05，差别有显著意义。卵巢上皮性交界性肿瘤与正常卵巢组织相比，OD值升高，P<0.05，差别有显著意义。卵巢上皮性交界性肿瘤与良性卵巢肿瘤相比，OD值升高，P<0.05，差别有显著意义。良性卵巢肿瘤与正常卵巢组织相比，差别无显著意义。111、W期卵巢癌与I、n期卵巢癌相比，OD值升高，P<0.05，差别有显著意义。随分化程度的逐渐降低OD值升高，差别无显著意义。在卵巢癌各组织类型中其差别无显著意义。 3 Survivin mRNA和Caspase一3 mRNA表达的关系 统计学分析表明Stirvivin mRNA和Caspase一3 mRNA表达呈负相关。讨论 1 CasPase一3 mRNA在卵巢上皮性癌中的表达及意义。 在细胞凋亡中Caspase一3起到效应执行作用，即Caspase一3被激活后将启动细胞凋亡的DNA酶，因此Caspase一3是细胞凋亡过程关键酶。Caspase一3的表达不但反映细胞的凋亡水平，而且映射出凋亡启动因素的存在。本实验应用原位杂交技术检测CasPase一3 mRNA在卵巢上皮性癌组织中的表达，结果表明Caspase一3 mRNA在卵巢?