野桂花蜜多酚的提取分离及抗氧化性研究

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本文选取天然野桂花蜜为原料,利用响应面实验确立野桂花蜜中酚类化合物的最佳提取方法及条件,通过大孔树脂以及聚酰胺树脂对野桂花蜜多酚的粗提物进行分离纯化,采用HPLC对各个提取分离阶段野桂花蜜多酚中的14种单酚含量进行定性和定量的分析。并在此基础上对不同分离阶段的野桂花蜜多酚提取液进行了抗氧化作用的初步研究,具体研究内容和结果如下:1、用单因素实验和响应面法优化实验对野桂花蜜多酚的超声波辅助溶剂提取进行了研究,研究结果表明:使用盐酸-乙酸乙酯复合溶剂,浓度为62%,料液比为1:10(m/v),超声波时间为21 min,超声波温度为54℃,在此工艺条件下,得到的野桂花蜜多酚的平均得率为68.27 mg/10g。然后用传统有机溶剂浸提工艺对其进行对比研究,发现超声波辅助提取野桂花蜜多酚的得率较高,更适合野桂花蜜多酚的提取。2、比较了4种不同大孔树脂纯化野桂花蜜多酚方面的特性。实验表明:XAD-2树脂纯化野桂花蜜多酚的效果最好;XAD-2树脂的吸附量为36.9±1.26 mg/g,解析率为7812±1.17%,并且达到吸附平衡与解析平衡的时间较短,较适合野桂花蜜多酚的纯化。最佳工艺参数为样液多酚浓度2.5 mg/mL、最适宜pH为6,上样流速2 BV/h、洗脱剂为80%乙醇溶液、洗脱流速2 BV/h、洗脱剂用量4 BV。在此条件下,野桂花蜜多酚的纯度由9.52%提高到52.8%。通过XAD-2大孔树脂初步纯化结合聚酰胺树脂进一步分离,经过测定后,制备样品中的野桂花蜜多酚得到较大程度富集,野桂花蜜多酚的纯度提高到84.55%。3、通过HPLC分析,确定了的13种野桂花蜜多酚的组分含量,其中芦丁(276.68±0.43 mg/10g)为主要成分,含量最高,肉桂酸(141.16±1.29 mg/10g)次之。芹菜素(2.47±0.03 mg/10g)含量相对较低。实验结果表明乙酸乙酯的萃取过程、XAD-2树脂和聚酰胺树脂的纯化过程并不影响野桂花蜜多酚的组成。4、比较了四个分离提取阶段的四组试样中的总酚含量与其抗氧化活性。证明了不同组分的总酚含量、还原能力以及其抗氧化能力不同,其总酚含量与还原能力呈正相关,野桂花蜜多酚对DPPH自由基、超氧阴离子和羟基自由基均具有一定的清除能力。研究结果表明野桂花蜜多酚具有很好的体外抗氧化活性。
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