论文部分内容阅读
目的:探讨SFTPB基因多态性在阻塞性睡眠呼吸暂停（Obstructive sleep apnea,OSA）人群与非OSA人群中的分布以及与肺泡表面活性物质相关蛋白B（Surfactant protein B,SP-B）的关系;分析SFTPB基因多态性是否存在连锁不平衡现象及其单体型与睡眠呼吸暂停易感性的相关性;探讨SFTPB基因位点多态性与环境的交互作用与OSA的关系;进而揭示SFTPB基因多态性及SP-B在OSA患者中潜在的发病机制,为OSA遗传学病因研究提供新证据。方法:1.本研究为横断面研究,按照排除标准,连续选取2016年4月起至12月首次就诊于新疆维吾尔自治区人民医院高血压中心睡眠中心的18岁以上的可疑OSA患者,进行整夜多导睡眠监测（Polysomnography,PSG）并记录完整临床资料,根据OSA诊断指南及睡眠监测结果,最终纳入169例重度OSA患者与176例非OSA患者分别作为病例组与对照组。2.采用竞争性等位基因特异性PCR（Kompetitive Allele Specifc PCR,KASP）技术对所有研究对象的SFTPB基因的3个多态性位点rs2077079、rs1130866、rs3024791基因型与等位基因分布情况进行检测,同时应用酶联免疫吸附法（Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）对所有研究对象PSG次日晨起空腹外周血血清中SP-B浓度进行检测。3.统计学处理采用SPSS 20.0软件进行,相关危险因素分析采用二元及多元logistic回归;基因与环境交互作用采用非条件的logistic回归;连锁不平衡和单体型分析采用SHEsis在线软件进行处理。结果:1.按照睡眠呼吸暂停低通气指数（Apnea hypopnea index,AHI）分别在重度OSA组与非OSA组的中位数分亚组为四组后,SP-B水平在重度OSA组明显低于非OSA组（P=0.045）;2.肥胖（OR=3.96;95%CI:1.98-7.92;P<0.001）、男性（OR=3.62;95%CI:1.54-8.54;P=0.003）和低SP-B水平（OR=1.99;95%CI:1.03-3.86;P=0.040）是重度OSA的独立危险因素。3.在非吸烟人群中,rs1130866的TT基因型者SP-B蛋白明显高于CT基因型及CC基因型者,且呈现出明显的浓度梯度,差异具有统计学意义（P=0.006）;但在总人群及吸烟者中,三位点各基因型所相应的SP-B浓度无差异（P均>0.05）;4.在非吸烟人群中,校正了BMI及2型糖尿病病史等混杂因素后,rs1130866位点CC基因型（OR=5.808;95%CI:1.559-4.613;P=0.009）是低SP-B蛋白浓度的独立危险因素。5.SFTPB基因3个SNP位点中,rs1130866位点基因型、隐性模型和等位基因频率在重度OSA组和对照组中差异有统计学意义（P均<0.05）;其中重度OSA组rs1130866-C等位基因频率明显高于对照组（P=0.011）;rs2077079、rs3024791位点基因型和等位基因频率在重度OSA组和对照组中分布均无差异（P均>0.05）,而rs2077079位点在女性人群中基因型和隐性模型中两组基因频率分布差异有统计学意义（P均<0.05）;6.肥胖（OR=7.467;95%CI:4.291-12.992;P<0.001）、高龄（OR=2.116;95%CI:1.202-3.723;P=0.009）、男性（OR=5.055;95%CI:2.526-10.117;P<0.001）、rs1130866位点CC基因型（OR=2.682;95%CI:1.559-4.613;P<0.001）和rs2077079位点CC基因型（OR=2.554;95%CI:0.010-0.770;P=0.004）是重度OSA的独立危险因素。7.在隐性模型中,通过比较了SFTPB基因rs1130866及rs2077079位点的临床生化指标及睡眠参数。发现rs1130866位点CC基因型组相比较于CT+TT基因型组的AHI显著升高（34.7 vs 3.7events/h,P=0.001）,暂停指数（Apnea Index,AI）升高（16.20 vs 0.60 events/h,P=0.001）,低通气指数（Hypopnea Index,HI）升高（5.30 vs 2.80 events/h,P=0.019）,平均血氧饱和度（Mean saturation of oxygen,MSaO2）降低（P=0.024）。rs2077079位点AA基因型显示AHI（3.7 vs 31.2events/h,P=0.002）,AI（0.70 vs 10.10 events/h,P=0.012）和HI（2.40 vs 4.05mmol/L,P=0.003）水平均明显低于对照组（CC+AC）;最低血氧饱和度（Lowest saturation of oxygen,LSaO2）明显高于对照组（85.00 vs 79.00 events/h,P=0.029）。8.SFTPB的3个位点在总人群中所构建的单体型有8种,其中Hap 2-AAT、Hap 3-ACC、Hap7-GCT单体型频率在重度OSA组与对照组间的差异有统计学意义（P均<0.05）。9.吸烟和rs1130866位点的交互作用与重度OSA发生存在相关性（OR=5.75;95%CI:2.14-15.49;P=0.001）。结论:1.重度OSA人群血清SP-B浓度明显低于非OSA人群,低SP-B水平是重度OSA的独立危险因素;而且,在非吸烟人群中,携带SFTPB基因rs1130866位点纯合突变型CC者SP-B浓度明显减低,rs1130866位点CC基因型是低SP-B水平的独立危险因素。2.SFTPB基因rs1130866位点多态性在重度OSA人群与非OSA人群中分布不同,rs1130866位点纯合突变型CC是重度OSA的独立危险因素;相对于单体型Hap 8-ACT,单体型Hap 3-ACC是重度OSA的危险因素;吸烟与rs1130866位点CC基因型的交互作用增加了重度OSA的发病风险。