酒精法去上皮对角膜上皮紧密连接影响的研究

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目的:探讨屈光手术中酒精法去上皮对大鼠角膜上皮紧密连接的影响。方法:60只SD大鼠随机分为酒精组和机械组,各30只。在各组内再将大鼠随机六组(A、B、C、D、E、F),每组5只,每只大鼠随机选择一只眼作为手术眼,另一只眼作为对照眼。分别用来观察24 h大鼠角膜上皮缺损直径、检测24、48、72、96、120 h角膜上皮claudin-1、ZO-1蛋白的表达情况。心脏注药法处死动物,取眼球,用OCT冰冻包埋,制作冰冻切片,HE染色,免疫荧光法检测角膜上皮紧密连接蛋白表达光密度,进行统计学比较。结果:1.去上皮时间:酒精组和机械组去上皮时间的差异有统计学意义(P<0.05)。2.角膜上皮中央缺损直径:24 h手术显微镜下观察60只大鼠的手术眼,中央区角膜上皮均有缺损。裂隙灯照相分析酒精组和机械组A组大鼠术眼角膜上皮缺损直径的大小,酒精组和机械组角膜上皮缺损直径差异无统计学意义。手术显微镜下观察48 h实验大鼠手术眼角膜上皮光滑,均未见缺损。3.组织病理学改变:HE染色结果显示两组48 h移行的角膜上皮完全覆盖损伤的部位,但仅2~3层上皮细胞,细胞形态异常,变大、扁平延长。96 h角膜上皮基本恢复正常形态。4. ZO-1蛋白表达差异:ZO-1主要在角膜上皮表层细胞表达,24、48 h酒精组和机械组角膜上皮ZO-1蛋白的表达差异有统计学意义(P<0.05)。72、96、120 h ZO-1蛋白的表达在酒精组和机械组差异无统计学意义。5. claudin-1蛋白表达差异:claudin-1主要在角膜上皮翼状细胞和基底细胞层表达,24、48 h酒精组和机械组角膜上皮claudin-1蛋白的表达差异有统计学意义(P<0.05)。72、96、120 h claudin-1蛋白的表达在酒精组和机械组差异无统计学意义。结论:屈光手术手术中酒精法去上皮较机械法去上皮速度快,二者角膜上皮再生时间未见明显区别。但酒精法去上皮较机械法影响角膜上皮紧密连接的修复,说明20%酒精去上皮影响角膜上皮的修复。
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