目的:以浙江省七家地区代表性医院临床分离的院内感染鲍曼不动杆菌为研究对象，了解鲍曼不动杆菌院内感染现状及耐药性分布特征，找出主要的流行克隆株并研究其耐药性传播机制。　　 方法1.细菌培养:将保存合格的398株临床分离株自-80℃超低温冰箱中取出，置于室温融化复苏后，在生物安全柜操作台上采用三区划线法接种于羊血琼脂平板，放入35℃恒温培养箱孵育过夜。　　 2.细菌鉴定:从羊血琼脂平板上挑取单个菌落，VITEK-32型全自动微生物分析仪自动鉴定。　　 3.细菌鉴定复核:由VITEK-32型全自动微生物分析仪鉴定的鲍曼不动菌，经PCR扩增16S rDNA测序复核确定菌种为鲍曼不动杆菌。　　 4.抗菌药物敏感性试验:采用琼脂稀释法测定398株院内感染鲍曼不动杆菌对15种抗菌药物的MIC值，结果判定为敏感、中介、耐药。判定标准参照2010年美国临床实验室标准化协会(CLSI)标准。　　 5.脉冲场凝胶电泳(PFGE):参照病原菌分子分型实验室监测国际网络PluseNet公布的鲍曼不动杆菌的标准化PFGE分子分型方案。鲍曼不动杆菌菌株用ApaI酶切，标准菌株H9812用XbaI酶切。采用PFGE398株鲍曼不动杆菌进行分子分型。　　 6.多位点序列分型(MLST):根据PFGE结果从各地区挑选主要流行克隆株，进行MLST试验。应用eBURST程序将STs归为谱系(clonal complex)，采用UPGMA方法构建系统进化树，采用SplitsTree软件构建ST型亲缘关系树。　　 7.生物膜形成试验:采用96孔板结晶紫染色法检测鲍曼不动杆菌在LB培养基中生物膜的形成能力。参照Stepanovic等的评估方法，将菌株生物膜形成能力分为四类，运用SPSS11.0分别对细菌的耐药率与生物膜形成能力进行相关性分析。　　 8.质粒接合转移试验:选取每个地区的主要流行克隆株进行质粒接合转移试验，对接合子进行质粒提取鉴定、药敏试验研究。　　 结果:1.院内感染鲍曼不动杆菌病例以老年患者（年龄＞60岁）、呼吸道感染患者及ICU患者居多，分别占38.94％，73.37％和40.95％。　　 2.398例鲍曼不动杆菌对15种常用抗菌药物耐药率超过50％的抗菌药物有11种，占总体的73.33％;对氨苄西林耐药率最高，为95.48％;对β-内酰胺类抗生素普遍耐药，对第三代头孢菌素（头孢噻肟，头孢曲松和头孢他啶）的总耐药率为74.04％，对第四代头孢菌素头孢吡肟的耐药率为57.54％;对头孢哌酮/舒巴坦及碳青霉烯类抗生素耐药率分别为23.62％和29.15％。　　 3.PFGE结果显示398株鲍曼不动杆菌分为31个PFGE型5个主要流行克隆群，A群，236株，占试验菌株数的59.3％，在除宁波、嘉兴外的5个地区均有分布，且均为该地区鲍曼不动杆菌的主要流行克隆株。B群，30株，占试验菌株数的7.5％，其中20株分离自丽水，10株分离自温州和绍兴。C群，21株，占试验菌株数的5.3％，其中19株分离自宁波，3株分离自杭州。D群，19株，占试验菌株数的4.8％，分离自绍兴和杭州。E群，13株，占试验菌株数的3.3％，分离自杭州、宁波、嘉兴和温州。　　 4.根据PFGE结果从各地区挑选其主要流行克隆株，共计45株进行MLST试验，结果显示所选菌株属于14个ST型，其中9个为新发现的ST型，本研究中以ST1000～ST1008表示。　　 5.定量测定242株多重耐药鲍曼不动杆菌生物膜形成情况，其中17株为（-），71株为(+)，71为(++)，83株为（+++），92.97％的菌株具有生物膜形成能力，其中63.63％具有中等或强的生物膜形成能力，并且随生物膜形成能力增强，对复方新诺明、头孢曲松、环丙沙星、哌拉西林、美罗培南、头孢哌酮/舒巴坦、头孢吡肟、头孢他啶、阿米卡星、氯霉素的耐药性升高(P＜0.05)。　　 6.选取每个地区的主要流行克隆株（41株多重耐药鲍曼不动杆菌）为供体菌进行质粒接合转移试验，其中14株多重耐药鲍曼不动杆菌与受体菌（利福平耐药的大肠埃希菌EC600）的质粒接合转移试验为阳性，占34.15％。供体菌、受体菌和接合子的药敏试验结果表明，供体菌质粒上所带的部分抗菌药物的耐药性传给了受体菌。　　 结论:由鲍曼不动杆菌导致的院内感染形势严峻，耐药情况严重，克隆播散是造成院内感染鲍曼不动杆菌不断涌出的主要原因。