当归芍药散中阿魏酸含量的测定及其药代动力学研究

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目的当归芍药散出自张仲景所着《金匮要略》,有当归、芍药、川芎、茯苓、泽泻、白术组成,早先主要应用于妇科痛证的治疗,近年来发现当归芍药散具有抗神经炎症、调节神经递质、抗氧化等多种药理作用,可用于治疗阿尔兹海默病,血管性痴呆等多种疾病;而阿魏酸是其中当归和川芎的主要成分,被发现具有类似于当归芍药散的抗神经炎症、抗氧化等作用,除此外还具有调节血脂、血压等作用,被用于治疗神经退行性疾病,心血管疾病,糖尿病并发症等多种疾病,被认为是方中主要的药效成分。本实验将研究如何测定当归芍药散中阿魏酸的含量,并研究阿魏酸单体和当归芍药散中阿魏酸在大鼠体内的药代动力学。方法建立测定当归芍药散中阿魏酸含量的Hplc-UV检测方法,在验证其方法专属性、准确度、精密度、稳定性后测定当归芍药散中阿魏酸含量。根据建立的血液中阿魏酸含量测定方法,按0.3mg/kg (50mg/kg)给予当归芍药散(阿魏酸单体)后0.083、0.167、0.333、0.5、0.75、1、1.5、2、4、6h自眼眶后静脉丛取血,取200ul血浆,加入含有内标的1.5mlEP管内,加入50u10. lmol/ml盐酸混匀后用lml乙酸乙酯提取,提取液在氮气流下吹干后用50ul甲醇复溶,进样20ul,分析不同时点阿魏酸的血药浓度。根据阿魏酸的血药浓度使用3P87软件进行药代动力学参数拟合,得到相应的药动参数。结果经方法学验证,本实验建立的当归芍药散中阿魏酸含量的Hplc-UV检测方法快速、准确、可靠、稳定,可用于检测当归芍药散中阿魏酸含量。经测定,本此实验所制备的当归芍药散中阿魏酸是含量为0.088‰。给予当归芍药散后,阿魏酸在大鼠体内的代谢的药代动力学参数Cmax, Tpeak, AUC, MRT, K(Terminal)分别为20.24±2.22ng/ml,0.28±0.096h,16.26±1.14(ng/m1)*h,0.49±0.01h,0.46±0.101/h。给予当阿魏酸单体后,阿魏酸在大鼠体内的代谢的药代动力学参数Cmax,Tpeak, AUC,MRT,K(Terminal)分别为43.65±13.35ng/ml,0.17±0h,19.19±5.03(ng/m1)*h,0.68±0.13h,0.14±0.0551/h。结论本实验建立了一个简便易行的当归芍药散粉末中阿魏酸含量的测定方法,并成功应用于自制的归芍药散粉末中阿魏酸含量的测定。本实验还研究了灌胃给予当归芍药散和阿魏酸单体后阿魏酸在大鼠体内的药代动力学过程,为阿魏酸的药代动力学研究提供了进一步的实验数据。
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