NaYF4:Yb,Er上转换纳米材料的制备及其用于DNA荧光纳米探针的构建

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随着纳米科学的发展,科研工作者发现上转换纳米材料(UCNPs)具有优异的光学性能,它能克服传统发光材料的多种不足,尤其是其激发波长位于近红外区,以UCNPs作为标记材料可有效避免生物样品的自体荧光和光散射,大大提高了检测的灵敏度。DNA分子也属于纳米材料,它有着卓越的自组装能力、超强的分子识别能力等优点,很适合用于纳米器件的构建。UCNPs与DNA分子相结合可构建DNA荧光纳米探针,在生物领域具有巨大的应用潜力。本文对NaYF4:Yb,Er纳米粒子的制备进行了详细研究,并与DNA分子相结合,构建了一种具有分子识别功能的DNA荧光纳米探针。赭曲霉毒素A(OTA)是农产品中常见的天然污染物,在生长、采收、采后处理、贮存等过程中极易产生。许多国家和地区都对OTA含量进行了限量,所以在农产品质量控制中对OTA检测具有十分重要的意义。核酸适配体是一段单链的DNA或RNA序列,它在生物应用领域已经显示出广阔的应用前景,尤其是作为分子识别元件广泛用于食品安全中有害小分子的检测。本文在DNA分子设计时,以OTA为检测物质,构建了可用于OTA检测的DNA荧光纳米探针,并验证了该探针具有可用性,希望能为OTA或其它物质的简便、价廉、快速检测提供新思路。第一部分对NaYF4:Yb,Er纳米粒子的制备过程进行了详细的研究。采用热裂解法,以稀土硬脂酸盐为前驱物,通过对不同试验条件的详细探索,制备了油酸包覆的β相、粒径小、均匀、单分散、荧光性能良好的NaYF4:Yb,Er纳米粒子。在反应温度为315℃、反应时间为45 min、OA/ODE=12:8、NaF/RE=28:1的条件下制备的纳米粒子效果最佳。制备完成后使用多种手段对材料进行了表征,包括X-射线粉末衍射、透射电镜、能谱、傅里叶变换红外光谱、荧光光谱等,表征结果说明成功制备了NaYF4:Yb,Er纳米粒子。第二部分将NaYF4:Yb,Er纳米粒子结合DNA分子,构建了一种DNA荧光纳米探针,并验证了所构建的探针具有可用性。采用配体交换法,通过设计不同的与含OTA核酸适配体DNA互补的DNA序列Sp将纳米粒子表面的油酸置换,得到具有良好的水溶性并能与靶标分子特异结合的DNA荧光纳米探针。通过精细的探索,平均粒径为44.9 nm的纳米粒子与25 nmol的36 bp的Sp3反应24 h,配体交换效果最佳。所构建的荧光纳米探针Sp3-UCNPs有望成为实现对OTA的特异性检测的新工具。此外,将Sp序列改变为其它的目标DNA序列,则该探针可用于其它物质的检测。
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