二穗短柄草(Brachypodium distachyon)是一种广泛分布于温带地区的禾本科植物,基因组小、染色体少、DNA重复序列少、植株较矮、生育期短、不需要严格的生长条件和栽培措施,与小麦族植物一样具有二倍体、四倍体和六倍体,是一种新型的禾草模式植物。在禾谷类转基因研究中,成熟胚因其取材方便,生理状态一致,而成为组织培养和遗传转化理想的外植体。本实验采用农杆菌介导法和基因枪转化法同时应用于二穗短柄草成熟胚愈伤组织的遗传转化上,并对其转化效率以及转基因在植物中的表达情况进行了研究。主要结果如下：1.二穗短柄草高效离体再生体系的建立以二穗短柄草三个品系BD21,BD21-3和BDR018成熟胚为外植体,研究了2,4-D浓度和硫酸铜对愈伤组织诱导率的影响及愈伤组织年龄对再生的影响。结果表明：添加0.6mg/L CuSO4和2.5mg/L2,4-D的MS2.5+Cu诱导培养基上,胚性愈伤组织的诱导率最高,三个品系的诱导率分别为86.2%,85.0%和72.3%。愈伤组织年龄为7周时再生率最高,分别为98.1%,99.3%和83.3%。随愈伤组织年龄的增加,再生率降低,白化率升高。2.二穗短柄草遗传转化体系的建立选取年龄75d的BD21和BD21-3品系的胚性愈伤组织为受体材料。用包被有质粒pDM803,J34和J53的金粉-DNA混合液轰击,经过抗性愈伤组织的筛选和抗性植株再生,统计转化率。结果表明：在基因枪转化法中,BD21和BD21-3用质粒J34轰击的平均转化率最高分别为7.2%和13.5%,而质粒pDM803转化率最低。农杆菌介导转化的最高转化率为13.8%。0.01%Silwet L-77、真空处理及添加AS均可显著提高转化率。3.抗性植株的检测通过GUS组织化学染色,农杆菌介导的植株中有62.7%的植株能够在植物体内稳定表达。而基因枪转化的植株中只有30%。经过PCR检测,除了非转基因对照植株以外,所有的抗性植株均扩增出了357bp的bar基因DNA片断。利用Basta除草剂对T1代植株进行喷洒筛选,初步确定bar基因的分离规律完全符合孟德尔遗传分离规律。