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葛花和川芎是我国传统的药用植物,有着深厚的理论及应用基础。目前,葛花主要集中于治疗抗糖尿病的研究,而川芎主要集中于调节神经系统功能的研究。脑卒中作为一种脑血液循环障碍性疾病,极大影响发病者的日常生活,据文献报道,葛花和川芎对于缺血性脑损伤以及后续引发的继发性过氧化脑损伤有一定作用,但其有效成分的分离纯化及作用机制的相关报道较少。因此,对药用植物葛花和川芎中抗缺血性脑卒中有效成分的分离纯化及活性筛选与评价有待深入研究。本文以药用植物葛花和川芎为研究对象,采用超滤质谱(UF-LC-MS)活性筛选技术,对葛花和川芎中有效成分进行了活性筛选及结构鉴定,同时,进一步探究了葛花中有效成分对损伤PC12细胞的保护作用,以及川芎中有效成分在大鼠肝微粒体中的代谢产物及途径。以活性为导向,应用高速逆流色谱(HSCCC)结合半制备高效液相色谱(Semi-preparative HPLC)技术,分离纯化了葛花和川芎中有效成分,并采用色谱、质谱等技术对葛花、川芎中有效成分进行了分析研究。具体研究工作内容如下:首先,利用HSCCC技术从葛花中一次性分离得到3种高纯度有效成分,经初步鉴定,分别为葛根素(Puerarin)、鸢尾苷元(Tectorigenin)和染料木苷(Genistin),其纯度分别为90.60%、99.00%和91.73%。采用UF-LC-MS技术从葛花中筛选得到3个潜在的乳酸脱氢酶(LDH)抑制剂、3个潜在的α-葡萄糖苷酶(α-glucosidase)抑制剂,结果表明葛花中有效成分对于黄嘌呤氧化酶(XOD)无明显抑制活性。同时,采用MTT法考察了葛花提取物对MPP~+损伤的PC12细胞的保护作用,结果表明,与MPP~+损伤组比较,葛花提取物组细胞存活率显著升高,说明葛花提取物对受损的PC12细胞具有保护作用。其次,利用液-质联用(UPLC-Q-Exactive)技术快速鉴定了川芎提取物中两类化学成分(主要为苯酞、酚酸类)。应用HSCCC结合Semi-preparative HPLC技术对川芎粗提物进行了分离纯化,共分离得到4种有效成分,分别为川芎嗪(Ligustrazine)、阿魏酸(Ferulic acid)、Z-藁本内酯(Z-ligustilide)和3-亚丁基苯酞(3-Butylidenephthalide),其纯度分别为90.60%、99.24%、97.01%和97.86%。采用UF-LC-MS技术从川芎中筛选得到2种潜在的LDH抑制剂及3种潜在的超氧化物歧化酶(SOD)抑制剂。同时,基于大鼠肝微粒体(CYP450)体外代谢体系,采用UPLC-Q-Exactive技术,对川芎中有效成分阿魏酸、Z-藁本内酯在大鼠肝脏细胞中的代谢产物以及代谢途径进行了系统研究,结果显示在大鼠CYP450中,阿魏酸的稳定性代谢过程为葡萄糖醛酸化、羟基化、脱羧基,Z-藁本内酯的稳定代谢过程为脱羰基、去甲基化、脱羟基等。综上,本论文系统地对药用植物葛花和川芎中的有效成分进行了分离纯化、结构鉴定、活性筛选及作用机理的研究,实现了快速分离筛选、鉴定和评价药用植物葛花和川芎中有效成分的研究目的。