水稻黄单胞菌双精氨酸运输(Tat)系统关键基因的克隆与功能分析

来源 :南京农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:heroszk2
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
水稻黄单胞菌包含两个致病变种Xanthomonas orzae pv.oryzae(Xoo)和X.oryzaepv.oryzicola(Xooc),在水稻上分别引起白叶枯病和细菌性条斑病。在本研究中,我们鉴定了水稻白叶枯病菌PXO99菌株和水稻条斑病菌RsGD42菌株的双精氨酸运输(Tat)途径,明确了Tat系统对这两种植物病原菌在游动性,趋化性,胞外多糖和毒力方面的影响。(一)根据GeneBank数据库中Xoo KACC10331和MAFF311018的tat基因序列设计引物,采用PCR方法从Xoo PXO99中克隆了tat同源基因,命名为tatXoo。通过同源重组的方式成功构建了PXO99菌株tatB和tatC基因的插入突变体,经PCR和Southern杂交验证确认。野生型菌株PXO99细胞在0.3%NA软琼脂平板上具有强游动性。而tatB和tatC基因突变体游动性削弱。而且,tatB和tatC基因突变体细胞缺失了鞭毛,并且在有氧条件下都不能对葡萄糖产生趋化应答。这表明,Tat分泌系统与鞭毛的形成和趋化性应答相关。同时tatB和tatC基因突变体减少了胞外多糖的分泌量。另外,与野生型菌株PXO99相比,tatB和tatC基因突变体都极大削弱了在水稻上的毒力。然而,两种突变体仍然能激发非寄主烟草的过敏性反应。结果显示,Tat系统对水稻白叶枯病菌在水稻上的致病力起重要作用。(二)根据水稻黄单胞菌tat基因的同源性设计简并引物,采用PCR方法从水稻条斑病菌中克隆了tat同源基因,命名为tatXooc。通过同源重组构建了RsGD42的tatC基因突变体,经PCR和Southern杂交验证确认。与野生型菌株RsGD42相比,tatC基因突变体并不影响正常生长,并且仍可激发非寄主烟草的过敏性反应。有趣的是,tatC基因突变体缺失鞭毛,极大减弱了游动性。此外,在有氧条件下,该突变体对葡萄糖几乎不产生趋化性应答。明显地,与野生型菌株相比,tatC突变体减少了胞外多糖的分泌量,并且显著削弱了在成熟期水稻上的毒力。结果显示,水稻条斑病菌的Tat系统对其在水稻上的致病力起重要作用。
其他文献
随着现代化的不断发展,电力的需求越来越大,电力部门也面临着严重的挑战,对于城市来说主要是供电紧张的现象,低电压是农村用电所要解决的,就目前国家提出的建设新农村建筑,要针对农
本学位论文以桔小实蝇Bactrocera dorsalis为研究对象,采用局部点滴法测定了桔小实蝇不同地理种群对马拉硫磷、高效氯氰菊酯和阿维菌素3种常用杀虫剂的敏感性;在此基础上,采用
期刊
介绍了电能数据采集和应用的实践,结合实际工作介绍了电能数据采集系统的成熟应用。提出了在智能电网及售电侧智能化的趋势下深化应用的举措,包括继续推动数据源建设,实现线损分
目前国内主要以设计院EPC总承包模式的项目居多,设计院EPC总承包指的是设计院承包项目的勘察设计、采购、施工,试运行,移交等所有工作,使得勘察,设计,采购,施工等各环节间的
新冠肺炎疫情是新中国成立以来发生的传播速度最快、感染范围最广、防控难度最大的一次重大突发公共卫生事件,对中国是一次危机,也是一次大考.面对复杂形势和严峻挑战,中国人
期刊
社会的高速发展,带动了我国经济水平的提升,建筑行业面临着发展的机遇与挑战.各种新技术、新材料在工程领域中的应用改变了行业的发展模式,提升了建筑行业的发展水平.同时也
质量控制工作与安全管理工作作为房建工程首要开展的工作内容,要求全体参建人员必须保持端正、严谨的工作态度,积极将质量控制内容与安全管理内容贯彻落实到现场施工当中,以
如今,在一些地方和个别干部身上,仍存在着“不怕群众意见大,就怕上级说句话”的现象。这种只对上级负责不对群众负责的“怕”之错位屡遭诟病。其实,下级怕上级本无可厚非。从
要说在新中国成立60周年之际推出的全国出版战线影响最大,也最值得一提的书籍,那便是20册《星火燎原全集》了。由此这一恢弘的出版工程在断断续续经历了53个年头后圆满结束。