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目的：本研究首先成功建立新生SD大鼠缺氧缺血性脑损伤（hypoxic-ischemic braindamage，HIBD）模型，联合及分别给予重组人粒细胞集落刺激因子（recombinanthuman granulocyte colony-stimulating factor，rhG-CSF）和重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin，rh-EPO)干预，观察各个组SD大鼠在不同时间点运动行为学变化、脑组织HE染色的病理改变、脑组织细胞凋亡，外周血细胞变化，探讨联合应用rhG-CSF和rh-EPO发挥神经保护作用。方法：7日龄SD大鼠160只，雌雄不限，体重12~18g，随机分为五组：假手术组，HIBD模型组，rh-EPO治疗组，rhG-CSF治疗组，rh-EPO、rhG-CSF联合应用治疗组，每组均为32只。HIBD模型组、rh-EPO治疗组、rhG-CSF治疗组及联合应用治疗组，均先制备HIBD模型：先双重结扎大鼠左侧颈总动脉，从中间剪段，然后置于含8%O2和92%N2的低氧环境中，放置2h制备而成，即改良Rice法，治疗组在HIBD后即刻（分别或联合）给予rh-EPO（5000U/kg）腹腔注射，每日一次，连续五天，rhG-CSF（60μg/kg）颈部皮下注射，每日一次，连续五天；五组根据大鼠处死时间不同，分为4个亚组即6h组、24h组、72h组、7d组，每亚组均为8只。不同时间点观察各组运动行为学变化，脑组织病理变化，脑组织细胞凋亡及检测外周血细胞变化，所检测的数据结果采用SPSS17.0统计软件进行统计学分析。结果：（1）行为：7日龄SD大鼠在模型制成后均出现不同程度的行为异常。（2）脑组织外观：假手术组脑组织均正常，无水肿及缺血坏死等改变；模型组外观各时间点可出现不同程度的水肿、萎缩及液化坏死，rh-EPO、rhG-CSF分别治疗组各时间点脑组织轻度的水肿、萎缩等改变，无明显的液化坏死，而联合治疗组各时间点脑组织外观基本正常。（3）HE染色：①假手术组：在不同的时间点脑组织结构清楚、细胞无水肿及坏死；②HIBD模型组：在建模后6h出现细胞间隙增大，脑组织细胞可出现水肿、变性等病理改变；24h细胞间隙进一步增大，脑组织细胞出现不同程度的变形、坏死，神经细胞核出现溶解；72h细胞间隙显著增大，坏死细胞数目明显增多；7d时细胞排列比较紊乱，神经元数目明显减少，胶质细胞明显增生；③rhG-CSF、rh-EPO分别治疗组比相应的HIBD模型组各个时间点病理变化减轻：早期细胞水肿、变性好转，中后期细胞坏死较减少，胶质细胞增生减少。④联合治疗组比相应的分别治疗组各个时间点病理变化明显好转，细胞排列规则，胶质细胞增生不明显，无明显的液化灶。（4）TUNEL法检测脑细胞凋亡：HIBD组、rhG-CSF组、rh-EPO组、联合应用组与假手术组比较，HIBD组及治疗组在相对应的每个时间点脑组织细胞凋亡数目显著升高（P<0.05），差异有统计学意义。联合应用组与rhG-CSF、rh-EPO分别治疗组各个相应时间点比较脑细胞凋亡数显著降低（P<0.05），差异有统计学意义；而rhG-CSF组与rh-EPO组之间各个相应时间点比较脑细胞凋亡数无明显差别（P＞0.05），差异无统计学意义。假手术组脑细胞凋亡数：3.45±0.95个；HIBD组、rhG-CSF组、rh-EPO组、联合应用组脑细胞凋亡在6h分别为48.12±8.86、41.04±6.39、39.8±7.38、33.8±9.38；24h分别为58.12±7.84、49.36±7.83、50.31±6.86、36.14±6.32；72h分别为66.38±8.18、54.32±8.01、53.62±5.89、40.13±8.23；7d分别为56.46±6.78、34.23±7.16、36.37±6.25、25.36±4.48。（5）外周血细胞变化：rhG-CSF组、rh-EPO组、联合应用组与HIBD组、假手术组比较各个时间点外周血中白细胞（WBC）、红细胞(RBC)值无显著升高（P＞0.05），差异无统计学意义；rhG-CSF组、rh-EPO组分别治疗组在各个时间点外周血中白细胞、红细胞与联合应用组值无显著升高（P＞0.05），差异无统计学意义。假手术组、HIBD组、rhG-CSF组、rh-EPO组、联合应用组外周血中WBC（×109/L）值分别为：6h为5.37±1.18、5.48±1.79、6.86±1.54、6.41±1.68、7.15±1.79；24h为6.77±2.29、7.17±2.91、8.26±2.48、6.07±1.83、7.44±2.42；72h为6.91±1.52、6.49±2.93、7.08±1.75、7.47±2.74、8.31±1.82；7d为6.69±1.18、6.53±2.01、7.65±1.48、7.31±2.21、8.53±1.73；RBC（×1012/L）值分别为：6h为3.15±0.29、3.28±0.37、3.13±0.31、3.33±0.41、3.32±0.43；24h为3.13±0.31、3.23±0.33、3.23±0.39、3.34±0.43、3.45±0.43；72h为3.12±0.33、3.28±0.12、3.23±0.35、3.44±0.41、3.49±0.45；7d为3.23±0.33、3.28±0.32、3.25±0.35、3.54±0.46、3.51±0.42。结论：（1）rh-EPO、rhG-CSF联合应用比单一应用对7日龄SD大鼠HIBD后更能明显改善脑组织的水肿、坏死等病理改变，说明rhG-CSF或rh-EPO对新生大鼠HIBD具有神经保护作用，两者联合应用效果更明显，具有协同作用。（2）rh-EPO、rhG-CSF两种药物单独或联合应用近期对新生大鼠HIBD模型外周血细胞无明显增多等副作用。