促红细胞生成素对新生血管性青光眼的作用及相关机制研究

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目的:观察促红细胞生成素(EPO)和血管内皮生长因子(VEGF)在新生血管性青光眼患者玻璃体和房水中的表达情况,探讨EPO和VEGF对体外新生血管形成的作用。并应用氧诱导视网膜新生血管性小鼠模型,探索可溶性促红细胞生成素受体(sEPOR)对于病理状态下小鼠视网膜新生血管形成的作用。方法:1、采用酶联免疫吸附法检测2014年6月至2014年10月至我院眼科就诊的青光眼患者20名(20只眼)的玻璃体和房水中促红细胞生成素(EPO)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平。2、探讨EPO和VEGF对体外原代人脐静脉内皮细胞(HUVECs)血管管腔样结构生成以及毛细血管样结构生成的作用。3、应用氧诱导视网膜新生血管性小鼠模型,行FITC-dextran灌注后观察视网膜血管形态的变化,应用Real-time PCR和Western Blot等技术检测并探讨病理状态下小鼠眼部新生血管的EPO和VEGF蛋白表达的情况。结果:1、NVG患者眼房水和玻璃体中EPO和VEGF水平异常增高,与对照组相比差异具有统计学意义。2、EPO和VEGF处理的HUVECs细胞均可以在体外形成管腔样结构,跟对照组相比差异具有统计学意义(P<0.01)。EPO 10 IU/ml、EPO 100 IU/ml、VEGF10ng/ml三组对HUVECs细胞的增殖有很强的促进作用,作用显著超过对照组,结果存在统计学差异。EPO 100 IU/ml组与VEGF 10ng/ml组尤为明显,OD值明显高于对照组的,差异非常显著(P<0.01)。3、高氧可以成功诱导小鼠视网膜血管性病变模型。FITC-dextran灌注后显示sEPOR可以改善模型组小鼠视网膜灌注并抑制新生血管。Real-time PCR和Western Blot等技术显示sEPOR呈剂量依赖性下调病理状态下小鼠眼部新生血管的EPO和VEGF蛋白表达作用。结论:1、EPO和VEGF共同参与了新生血管性青光眼患者病理性新生血管形成的过程。2、EPO和VEGF在体外可以促进血管内皮前体细胞的分裂,对新生血管形成有很强的促进作用。3、sEPOR可以改善模型小鼠视网膜灌注并且能抑制新生血管形成,可以呈剂量依赖性下调病理状态下乳鼠眼部新生血管的EPO和VEGF的蛋白表达。
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