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抑郁症(Depression)不仅是对人的身心健康影响巨大的精神障碍性疾病,且具有高发生率、高自杀率等特性。因此,关于抑郁症发病原因、发病机制及防治策略方面的研究已经受到广泛关注。大量研究表明,抑郁症的发生与慢性应激相关,建立慢性不可预见性温和应激(Chronic unpredictable mild stress, CUMS)抑郁模型是抗抑郁药物筛选、抗抑郁药物作用机理研究和抑郁症发生的病理生理学研究的重要方法之一。也有研究表明,海马作为边缘系统的重要组成部分,也是与应激性反应高度相关的脑区,而5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、谷氨酸(Glutamic acid, Glu)等神经递质及受体均与抑郁的发生密切相关。a7nAChRs是烟碱样乙酰胆碱受体(Nicotinic ACh receptor, nAChR)中同源五聚体亚型之一,主要分布在海马、大脑皮层、下丘脑及一些脑干核团中。有研究发现海马内的乙酰胆碱酯酶(Acetylcholine esterase, Acl1E)与抑郁发生有关,nAChRs已作为精神病治疗药物的潜在目标,但其相关研究一直习惯性地集中于认知障碍性疾病的发生机制及治疗方面,而最近的科学研究及临床实验证据则证明nAChRs与抑郁症发生有关。研究表明,5-HT能神经元上含有a7nAChRs受体亚型,尼古丁通过激活a7nAChRs增加中缝背侧核中5-HT的释放频率,同时也可以增加前额叶几个区域5-HT的释放。也有研究证明,对Ca2+高渗透的同源性a7nAChRs主要位于谷氨酸神经终端,可以维持或促进Glu的释放,如Ach激发大鼠小脑中Glu的释放就是由突触前a7nAChRs调节的。a7nAChRs的激活可以使海马内Glu水平升高,而选择性a7nAChRs阻断剂美加明和α-银环蛇毒则可以通过阻止谷氨酸的神经毒性来达到神经保护的作用,已有研究结果提示应激引起突触变化的机制也可能与a7nAChRs的激活有关,而且a7nAChRs很可能与Glu、5-HT存在一定关系。然而,在慢性不可预见性应激性抑郁发生中海马a7nAChRs是否发挥作用,其作用是否是通过调节5-HT和Glu释放及其受体系统来实现并不清楚。为证明这一问题,本研究通过建立慢性应激性抑郁模型,双侧海马微量注射a7nAChRs激动剂SSR180711和拮抗剂甲基牛扁亭碱(Methyllycaconitine, MLA),观测了大鼠体重变化率,通过其糖水消耗率、悬尾不动时间及敞箱实验结果等来观察动物的行为表现,并运用蛋白印迹法(Western-blot, WB)检测了海马内a7AChRs及Glu的N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartic acid, NMDA)受体NR1、NR2B亚基的表达,高效液相色谱分析(High-performance liquid chromatography, HPLC)方法检测了海马Glu及5-HT含量,酶联免疫吸附实验(Enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)方法检测了a7AChRs受体磷酸化水平。研究结果如下：①与对照组大鼠相比,CUMS组大鼠的体重变化率、糖水消耗率、修饰得分、水平运动和垂直得分明显降低,悬尾不动时间明显升高,且差异极显著(n=12,p<0.01)。海马a7AChRs表达量明显升高(n=6,p<0.05),磷酸化水平极显著升高(n=6,p<0.01),5-HT表达无显著性降低,但Glu水平极显著升高(n=6,p<0.01), NMD A受体的NR1(n=6, p<0.05)、NR2B (n=6, P<0.01)亚基表达下降。②CUMS大鼠海马微量注射a7nAChRs激动剂SSR180711或拮抗剂MLA,动物体重变化率、糖水偏好率、修饰得分、水平运动得分和垂直得分与CUMS组大鼠相比均显著或极显著升高(n=12,p<0.05,p<0.01),悬尾不动时间极显著降低(n=12,p<0.01)。注射α7nAChRs拮抗剂MLA,可以极显著降低由应激引起的海马Glu含量的升高(p<0.01),显著或极显著增加NR1(p<0.05)和NR2B(p<0.01)的表达,而5-HT水平无显著性变化。注射a7nAChRs激动剂SSR180711后,极显著地增加了5-HT水平(p<0.01),Glu含量和NR1、NR2B亚基表达量均无显著性变化；③正常大鼠海马注射a7nAChRs激动剂SSR180711或拮抗剂MLA对动物的正常行为表现均无影响。与对照组相比,CON/SSR180711组5-HT的含量极显著性升高(p<0.0J),Glu水平显著升高(p<0.05), NR1、NR2B表达显著降低(p<0.05);正常大鼠注射拮抗剂MLA有降低Glu同时升高NMDA受体NR1、NR2B亚基表达量的趋势(0.08>p>0.05)。研究结果表明,海马a7nAChRs参与了应激性抑郁的发生。CUMS使海马a7AchRs表达增加及磷酸化水平提高,导致Glu过量释放及NR1、NR2B表达不足很可能是引起抑郁样行为发生的原因之一。海马a7nAChRs激动剂SSR180711和拮抗剂MLA可分别通过调节Glu系统和5-HT系统而发挥其抗抑郁效应。MLA可以通过抑制由应激引起的Glu释放,增加NR1、NR2B亚型的表达从而达到抗抑郁的效果,而激动剂SSR180711则通过极显著性升高大鼠海马5-HT水平达到抗抑郁的效果。