拟南芥IQM2参与成花调控与CaM信号关系的初步研究

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AtIQM2由At3G13600编码,含有1个IQ基序,是一个钙调素结合蛋白(calmodulin-binding protein,CaMBP),参与自主途径成花调控。适时地开花对植物的生长繁殖至关重要,这一过程受环境和内部因子的影响,在拟南芥中,这一复杂的过程被归类为6条既相互独立又相互联系的调控途径,即光周期、春化、赤霉素、温度、自主和年龄途径。本文在前人工作的基础上,对IQM2调控成花与钙调素信号的关系进行了初步研究,为后续的工作奠定基础,具体结果如下:1、“LQ”是IQ基序中IQM2与CaM结合的关键氨基酸残基。本研究将“LQ”缺失突变互补载体转入突变体iqm2-2中,经筛选共获得4株转基因株系,其中,3个株系的成花表型得以恢复,表明“LQ”并不是成花调控所需的关键氨基酸,提示IQM2没有介导CaM信号调控成花。2、CML24是1个钙调素类似蛋白,介导光周期途径成花调控。本研究通过杂交获得双突变体cml24-4iqm2-2。成花表型分析结果显示,长日照条件下,双突变体cml24-4 iqm2-2的迟花表型比cml24-4和iqm2-2都更加明显,暗示CML24与IQM2属于不同的开花调控通路,与上述结果不矛盾。3、钙调素参与了植物对病菌的反应。本研究连续测定了喷施PstDC3000(Pseudomonas syringae pv.tomato DC3000)植株在7天内的光合参数,发现野生型Ler的光量子产量比iqm2-2的下降更快,暗示iqm2-2参与了植物对病菌的反应。不过,相关机制有待研究。4、为了钓取包括钙调素在内的与IQM2结合的蛋白,将超表达载体P35s:HA-IQM2转入iqm2-2,提取蛋白进行免疫印迹杂交实验,结果表明,IQM2蛋白在植物体内有表达。此外,还构建了植物表达载体P35s"H4、PIQM2:HA、PIQM2:H2-IQM2,为钓取包括钙调素在内的与IQM2结合的蛋白奠定了材料基础。总之,IQM2调控植物自主径成花与CaM信号没有关系,但是可能参与了植物对病菌的反应。
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