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背景和目的： 食管癌是消化道常见的恶性肿瘤之一。在世界范围内，大约有超过450万人患食管癌，近年来食管癌的发病率正在逐年增加。我国河南省是食管癌的高发省份，目前食管癌的治疗方法主要包括外科手术、化疗、放射治疗和生物治疗。食管鳞状细胞癌是食管癌最常见的组织学类型，它的侵袭和转移是患者死亡的主要原因。 干扰素/维甲酸联合应用诱导细胞凋亡相关基因19(gene associated withretinoid-interferon—induced mortality19，GRIM-19)被定位于细胞核、线粒体以及细胞质。GRIM-19是NADH脱氢酶Ⅰ的亚单位，在线粒体的呼吸过程中发挥着重要作用。GRIM-19是参与干扰素与维甲酸引起细胞凋亡的基因，可以在正常组织中表达，但在肿瘤组织中却呈现出不同程度的异常表达。GRIM-19在细胞的增殖凋亡的过程中起着重要的调控作用，细胞的凋亡程序可以被它的过度表达激活，GRIM-19的低表达或者位点突变可以引起细胞的异常增殖，进而导致恶性转化。目前有很多的研究表明，GRIM-19是一种新的与肿瘤有关的凋亡基因[1]。 信号转导与转录激活因子3(Signaltransducer and activator of transcription3，STAT3)是一种双功能蛋白，主要在线粒体中存在，在细胞浆中定位并表达，与酪氨酸磷酸化信号通道偶联，其编码基因定位于人类第12号染色体上(q13至q14.1)。最近的研究表明STAT3在不同种类的肿瘤细胞中表达都异常增高，这对肿瘤的发生和发展起着关键作用。研究表明，GRIM-19作为STAT3表达和激活的负性调节因子之一，能够降低STAT3及其下游靶基因的表达，进而引起肿瘤细胞的凋亡。 髓样细胞白血病-1(Myeloidcell leukelia-1，Mcl-1)属于Bcl-2家族，是一种抗凋亡因子，在人类多种恶性肿瘤的发生与进展中发挥着重要作用。Mcl-1作为抗凋亡蛋白，它与促进细胞生存的生物学相关，这一相关性在造血细胞系统和恶性肿瘤中得以充分证实。因此研究Mcl-1在肿瘤组织中的异常表达意义深远。 本研究将采用免疫组化法(SP法)检测50例食管鳞癌组织、50例正常食管黏膜组织以及30例癌旁不典型增生的组织中GRIM-19、STAT3、Mcl-1蛋白的表达以及Ki-67的表达;应用原位杂交法检测50例食管鳞癌组织、50例正常的食管黏膜组织、30例癌旁不典型增生的组织中GRIM-19、STAT3、Mcl-1 mRNA的表达;运用TUNEL方法检测食管鳞癌组织中肿瘤细胞的凋亡情况，从而探讨GRIM-19、STAT3、Mcl-1与食管癌细胞凋亡的关系及其可能机制。 材料与方法 1.实验所需组织切片均来自河南省肿瘤医院2013年1月-2013年12月间手术切除的病理标本。 2.采用免疫组化SP法分别检测GRIM-19、STAT3、Mcl-1蛋白以及Ki-67在50例食管鳞癌组织、30例癌旁不典型组织以及50例正常食管黏膜组织中的表达。 3.应用原位杂交法分别检测50例食管鳞癌组织、30例癌旁不典型增生和50例正常食管黏膜组织中GRIM-19、STAT3、Mcl-1 mRNA的表达。 4.应用TUNEL方法检测食管鳞癌组织中肿瘤细胞的凋亡情况。 5.统计学处理:实验数据使用SPSS17.0统计软件处理，对于符合正态分布的计量资料，统计分析时采用均数±标准差((X)±S)表示;阳性率的比较采用x2检验(chi-square);计量资料均数间的比较采用t检验(t-test)或方差分析(one-way ANOVA);等级资料的相关性分析采用Spearman等级相关分析;以α=0.05为显著性检验水准。 结果 1.GRIM-19蛋白、mRNA在食管鳞癌组织中阳性率明显低于癌旁不典型增生组织以及正常的食管黏膜组织，三者相比较，差异均具有统计学意义(P＜0.05)。GRIM-19蛋白、mRNA的表达阳性率与肿瘤浸润的深度、淋巴结的转移均显著相关，差异均具有统计学意义(P均＜0.05)，而与患者的性别、年龄均无关，差异均无统计学意义(P均＞0.05)。 2.STAT3蛋白、mRNA在食管鳞癌组织中的阳性率明显高于癌旁不典型增生的组织以及正常的食管黏膜组织，三者相比，差异均具有统计学意义(P均＜0.05)。STAT3蛋白、mRNA的表达阳性率与肿瘤浸润的深度、淋巴结的转移均显著相关，差异均具有统计学意义（P均＜0.05），而与患者的性别、年龄均无关，差异均无统计学意义（P均＞0.05）。 3.Mcl-1蛋白、mRNA在食管鳞癌组织中的表达阳性率明显高于癌旁不典型增生的组织和正常的食管黏膜组织，三者比较，差异均具有统计学意义(P均＜0.05)。Mcl-1蛋白、mRNA的表达阳性率与肿瘤浸润的深度、淋巴结的转移均显著相关，差异均具有统计学意义（P均＜0.05），而与患者的年龄、性别均无关，差异均无统计学意义（P均＞0.05）。 4.食管鳞癌组织中细胞的增殖活性Ki-67显著高于癌旁不典型增生组织中以及正常的食管黏膜组织中，三者比较，差异均具有统计学意义（P均＜0.05）。Ki-67蛋白的阳性表达率与肿瘤浸润的深度、淋巴结的转移均显著相关，差异均具有统计学意义（P均＜0.05），而与患者的年龄、性别均无关，差异均无统计学意义（P均＞0.05）。Ki-67的表达与GRIM-19蛋白、mRNA的表达均成负相关关系(r=-0.712，r=-0.606，P＜均0.05)，Ki-67的表达和STAT3蛋白、mRNA的表达均成正相关关系(r=0.878，r=0.623，p均＜0.05)，Ki-67的表达与Mcl-1蛋白、mRNA的表达均成正相关关系（r=0.653，r=0.589， p均＜0.05）。 5.GRIM-19蛋白、mRNA的表达与STAT3蛋白、mRNA以及Mcl-1蛋白、mRNA的表达均成负相关关系。（r=-0.652，r=-0.670， P均＜0.05）。 6.食管鳞癌组织中肿瘤细胞的凋亡与GRIM-19、STAT3、Mcl-1蛋白的表达有关。GRIM-19蛋白阳性表达组中肿瘤细胞AI为(5.32±0.83)％，显著高于阴性表达组的(1.41±0.05)％，差异具有统计学意义(P＜0.05)。STAT3蛋白阳性表达组中肿瘤细胞AI为(1.20±0.74)％，显著低于阴性表达组的(7.11±0.29)％，差异具有统计学意义（P＜0.05）。Mcl-1蛋白阳性表达组中肿瘤细胞AI为(1.53±0.69)％，显著低于阴性表达组的(5.88±0.25)％，差异具有统计学意义(P＜0.05)。 结论 1.GRIM-19低表达、STAT3和Mcl-1高表达与食管鳞癌发生、发展有关。 2.GRIM-19低表达、STAT3和Mcl-1高表达可能促进食管鳞癌细胞增殖。 3.GRIM-19可能通过下调STAT3表达，并进一步降低Mcl-1表达，从而引起食管鳞癌细胞凋亡。