鸡传染性法氏囊病病毒山东省野毒株分离鉴定及VP2基因酶切位点分析

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将野外采集的传染性法氏囊病发病的法氏囊等组成处理后,通过SPF雏鸡和SPF鸡胚增殖,获得5个分离株LC-1、LC-2、JN、LL和TA,经过琼扩试验、ELISA试验、血凝排除试验、抗原性测定、动物接种试验,鸡胚敏感试验,电镜观察等七项指标鉴定,确认为IBDV.其中,LC-1和LC-2株毒力较强,感染SPF雏鸡致死率为80%、60%,ELD<,50>/0.2ml分别为LC-2株毒力较强,感染SPF感染鸡胸腺萎缩症状较为突出,而且,TA株抗原特性变异较大,从抗原性、病原性等各方面来看,TA株类似于日本超强侏90-11.参照澳大利亚IBOV 002-73毒株基因组序列设计一对引物,位于VP2高可变区的两端,通过RT-PCR,扩增了各个分离株病毒PV2基因的607-1080 Ssp1、Pstl和Sau3Al共5个限制性内切酶进行处理,结果,5个分离株均为Dral(-)、Sacl(-)和Sau3Al(+),LC-2、LL和TA株为Pstl(-),5个分离株的酶切图谱与美国变异株迥异,而LL株、TA株与日本超强毒株90-11相类似.5个分离株与疫苗株对比差异较大,这表明,至少在VP2可变区内,分离自山东省野界外流行的IBDV毒株与疫菌毒株存在着一定的差异,这可能正是IBDV接种免疫鸡群仍然爆发IBD的原因所在.
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