CD133标记的脑胶质瘤干细胞放射损伤及修复的实验研究

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目的:探讨由CD133标记的脑胶质瘤干细胞(CD133阳性细胞)与非脑胶质瘤干细胞(CD133阴性细胞)辐射后DNA双链断裂损伤及修复的差异,从而研究影响脑胶质瘤干细胞放射敏感性的可能因素。方法:选择人脑胶质瘤U87、U251细胞系,采用免疫流式分选技术分选出CD133+、CD133-细胞;采用中性彗星实验检测4Gy X射线垂直照射后0.5h、6h、24hDNA双链断裂情况;间接免疫荧光技术检测照射后0.5h、6h、24h Rad51荧光灶的表达情况。结果:U87细胞分选后CD133+、CD133-细胞及U251细胞分选后CD133+、CD133-细胞在0Gy条件下彗星尾力距均无明显差异(t=1.67,P=0.171;t=1.80,P=0.147);4Gy照射后0.5h两种细胞系分选出的CD133+、CD133-细胞彗星尾力距均显著升高,但两种细胞亚型间差异均无统计学意义(t=1.44,P=0.224;t=1.09,P=0.339);6、24h U87细胞分选出的CD133+细胞彗星尾力距下降程度大于CD133-细胞(t=5.31,P=0.006;t=8.09,P=0.001), U251细胞分选出的CD133+细胞尾力距下降程度亦大于CD133-细胞(t=16.81,P=0.000;t=14.53,P=0.000)。U87细胞分选后CD133+、CD133-细胞及U251细胞分选后CD133+、CD133-细胞在0Gy条件下均有Rad51荧光灶的表达,但CD133+、CD133-细胞间表达率差异无统计学意义(t=2.41,P=0.074;t=0.44,P=0.681);4Gy照射后0.5h两种细胞系分选出的CD133+、CD133-细胞Rad51灶表达率均明显上升,但CD133+、CD133-细胞间无明显差异(t=1.12,P=0.265;t=2.50,P=0.067);6、24h U87细胞分选出的CD133-细胞相较CD133+细胞Rad51荧光灶表达率下降(t=22.88,P=0.000;t=12.43,P=0.000),U251细胞分选出的CD133-细胞Rad51荧光灶表达率亦下降(t=14.06,P=0.000;t=17.69,P=0.000)。结论:人脑胶质瘤干细胞CD133+细胞照射后损伤修复能力高于非脑胶质瘤干细胞CD133-细胞,这可能是影响人脑胶质瘤干细胞放射敏感性的一个因素。
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