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p23蛋白作为热激蛋白90(Hsp90)的辅助分子伴侣(cochaperone),在真核细胞内对许多重要的调控因子和信号蛋白具有调节作用。文昌鱼(Amphioxus)是介于无脊椎动物和脊椎动物之间的过渡类型,是研究脊椎动物进化的珍贵材料。利用分子生物学手段和生物信息学方法,研究文昌鱼p23基因的结构、进化和表达,可以揭示文昌鱼p23基因与无脊椎动物和脊椎动物p23基因之间的相互关系及其表达模式的异同,有助于从分子水平上阐释脊椎动物的起源和进化。本文从青岛文昌鱼(Branchiostoma belcheri tsingtaunese)肠cDNA文库(本实验室保存)中,克隆了具有完整编码框的p23基因(AmphiP23),并对其结构、表达和进化展开了研究。AmphiP23全长1455bp,编码170个氨基酸组成的蛋白。该蛋白在氨基酸水平上与人、小鼠、鸡、爪蟾、斑马鱼、海鞘、果蝇、线虫等的p23蛋白的相似性为25.3%-34.7%,与人的tsp23相似性为21.2%,且具有典型的p23保守域(8-114残基)和p23蛋白共有的保守残基(8W,79K,86W,89L,106W,人的氨基酸序号)。系统进化分析发现,无脊椎动物和脊椎动物p23蛋白分化为两个组群,而Amphip23介于脊椎动物和无脊椎动物p23蛋白之间,说明脊椎动物和无脊椎动物p23基因是在5.5亿年前由共同的祖先分化而成。人tsp23蛋白位于脊椎动物进化枝的基部,说明tsp23可能比脊椎动物p23蛋白更原始,脊椎动物p23和tsp23可能是由类似于文昌鱼AmphiP23基因发生了基因倍增形成的。 Northern blot结果表明,AmphiP23在文昌鱼成体组织中广泛表达(包括脊索、鳃、肌肉、肠、精巢和卵巢),相反,人p23在小鼠表达于除心脏和骨骼肌之外的所有组织(肝、肾、肺、胸腺、卵巢、脾和胃),而人tsp23基因的表达则仅限于心脏和骨骼肌,这种人p23和tsp23在小鼠的互补表达图式与Amphip23广泛表达可能说明,p23在发生基因倍增形成p23和tsp23之前,是广泛表达,而到脊椎动物出现两个基因和功能上的分化。原位杂交分析表明,AmphiP23在文昌鱼早期神经胚的近轴中胚层、脊索和神经管开始表达,随着神经胚的发育,