细胞牵引力（Cell Traction Force）：是细胞作用于细胞外基质的力。它是由肌动球蛋白的相互作用和肌动蛋白的聚合作用而产生的，细胞牵引力受α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）调控，并通过黏着斑作用于细胞外基质。细胞牵引力做为一个重要的物理学参数，与细胞的许多生物过程有着密切的关系，它对细胞的贴壁、移动、形态和信号传导等过程具有明显影响。通过研究小鼠肾肿瘤细胞的力学特性在细胞癌变过程中的变化规律，探索小鼠肾细胞牵引力的表达变化机制。目的：通过观察小鼠肾肿瘤细胞在诱导分化前后细胞牵引力和α-SMA蛋白的含量的变化，同时和正常小鼠肾细胞的参数进行比较，探索小鼠肾肿瘤细胞在分化过程中牵引力与α-SMA的变化规律，从而探明细胞在生长、发育和病变过程中细胞牵引力的变化机制，对基础生物学做一些探索性研究。方法与结论：1.细胞的培养。通过消化法获取小鼠肾细胞与肾肿瘤细胞后，置于CO2培养箱内培养。培养3~4d换液，去除未贴壁的细胞。用倒置显微镜观察细胞生长状态，待多数细胞形成较好的集落时，制成细胞玻片，其余部分继续培养备用。2.鬼笔环肽对微丝的特异性染色。利用鬼笔环肽与微丝的特异性结合的特点，对胞内微丝进行特异性染色，以观察比较小鼠肾正常细胞与肾肿瘤细胞内微丝分布特征的变化。结果显示小鼠肾肿瘤细胞内微丝分布无序，结构散乱，与肾正常细胞相比变化较大，说明细胞癌变后，细胞骨架结构发生了显著变化，这与肿瘤细胞的生理特性相适应。3.使用CTFM法进行细胞牵引力测定。CTFM基本原理是根据细胞基质弹性表面变形程度来进行测算细胞牵引力的技术。根据细胞的大小不同置备不同硬度的弹性基质，在制备弹性基质时掺入荧光微珠，方便确定基质的变形程度。将细胞种植于弹性基质表面，当细胞依附在基质表面后会使基质产生变形。先用荧光显微镜的普通光源拍摄一张细胞图片，再用荧光光源拍摄基质图片，然后使用1滴1M的NaOH将细胞杀死，使其脱离变形的基质表面，待弹性基质恢复原形后，拍摄第二张基质图片。在MATLAB7.0软件上运行专用程序，测算出细胞诱导分化前后的细胞牵引力。结果显示，小鼠肾肿瘤细胞经过诱导分化后，其细胞牵引力明显变大，平均值由281pa增加到550pa，增加了大约一倍左右，经过测算细胞投影表面积平均值由695um2增加到955um2，大约增加了37%，小鼠肾肿瘤细胞的最大牵引力由1200pa增加到1700pa。4．使用免疫印迹法检测α-SMA蛋白含量。用蛋白质免疫印迹法测定小鼠正常肾细胞及肾肿瘤细胞诱导分化前后细胞内α-SMA表达量。用鼠抗α-SMA做一抗，辣根过氧化酶标记的羊抗鼠免疫球蛋白做二抗，用ECL试剂盒显影。结果显示：诱导分化后肾肿瘤细胞内α-SMA表达量明显增加，接近正常细胞的含量。这说明肉桂酸对小鼠肾肿瘤细胞具有较好的诱导效果。