Th17细胞及其相关因子IL-17、IL-6和IL-23在类风湿关节炎发病中作用的研究

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目的:类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种自身免疫性慢性炎性疾病,以累及多个关节为主要特点,RA的病因尚未完全阐明,自身免疫反应以及相关的细胞因子被认为在RA的发病机制中有重要作用。CD4+辅助性T细胞(Th cell)是免疫应答和炎性疾病中的重要调节者,Th17细胞是Th细胞的新的亚群,以产生IL-17为主要特征,能发挥强大的致炎作用和关节破坏作用,同时很多细胞因子如IL-6和IL-23调节Th17细胞的分化,IL-6诱导体内Th17细胞的分化,IL-23参与Th17细胞的产生和增殖过程,Th17细胞及其相关因子IL-17、IL-6和IL-23可能在RA的发病过程中发挥重要作用。本研究通过检测RA患者外周血Th17细胞数量以及血清中IL-17、IL-6和IL-23的水平,探讨Th17细胞及其相关因子在RA发病机制中的作用。方法:本实验选取初次就诊RA患者30例,未曾应用糖皮质激素(glucocorticoid,GC)、改变病情抗风湿药(disease modifying antirheumaticdrug,DMARD)及生物制剂治疗,符合2009年美国风湿病学院(Americanrheumatism institute)和欧洲风湿病防治联合会(European congressprevention federation)的RA分类标准。选取20例健康人作为正常对照。两组均留取血清样本。RA患者记录年龄、病程、症状、关节肿痛数、DAS28评分以及类风湿因子(RF)、血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)等相关指标。采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(avidin biotin peroxidase complexenzyme-linked immunosorbent assay,ABC-ELISA)法测定RA患者血清中IL-17、IL-6和IL-23的水平,并与正常对照进行比较,Th17相关细胞因子与ESR、CRP、RF、DAS28评分等临床指标进行相关性分析;采用流式细胞仪(Flow cytometric,FCM)检测RA患者外周血Th17细胞的数量,与正常对照进行比较,并与ESR、CRP、RF、DAS28评分等临床指标进行相关性分析。数据分析采用SPSS17.0for Windows统计软件,计量资料以均数±标准差(x±s)表示,两样本比较用独立样本t检验,计数资料组间比较采用χ2检验,相关性采用直线相关分析,以P<0.05为差异有统计学意义。结果:1RA患者30例,男性10例,女性20例;年龄26~68岁,平均(50.23±10.85)岁;病程1个月~20年,中位病程42个月。正常对照组20例,男性6例,女性14例;年龄39~58岁,平均(46.90±5.38)岁。RA组与健康对照组在年龄及性别构成等方面无统计学差异(P>0.05)。RA组ESR(73.50±28.54)mm/h、CRP(54.12±37.18)mg/L、RF283.50(360.25)IU/ml、DAS28评分(6.53±1.21)。2RA患者血清IL-17、IL-6和IL-23的水平分别为(7.96±3.06)ng/L、(3.72±1.53)ng/L、(1019.15±291.57)ng/L,均较正常对照组(2.51±0.40)ng/L、(1.23±0.15)ng/L、(289.45±43.72)ng/L显著增高,差异有统计学意义(P<0.01)。3RA患者外周血Th17细胞的表达率为(2.35±1.03)%,较正常对照组(0.66±0.26)%显著升高,差异有统计学意义(P<0.01)。4RA患者血清IL-17、IL-6和IL-23的水平与病情活动指标相关性:IL-17水平与ESR、CRP以及DAS28评分呈显著正相关关系(r值分别为0.569,0.632,0.593,P<0.01),IL-6水平与ESR、CRP以及DAS28评分呈显著正相关关系(r值分别为0.585,0.575,0.649,P<0.01),IL-17、IL-6与RF无明显相关关系,IL-23与ESR、CRP、RF、DAS28评分均无明显相关关系(P>0.05),5RA患者Th17细胞表达率与实验室指标相关性:通过直线相关性分析显示,RA患者外周血Th17细胞表达率与ESR、CRP以及DAS28评分呈显著正相关关系(r值分别为0.561,0.586,0.574, P<0.01),与RF无明显相关关系。6RA患者Th17细胞表达率及血清IL-17、IL-6和IL-23水平之间的相关性:通过直线相关性分析显示,RA患者外周血Th17细胞表达率与IL-17水平呈显著正相关关系(r值为0.528,P<0.01),Th17细胞表达率与IL-6水平呈正相关(r值为0.404,P<0.05),IL-17与IL-6水平呈正相关性(r值为0.397, P<0.05),Th17细胞表达率、IL-17与IL-6水平均与IL-23水平无明显相关关系(P>0.05)。结论:1RA患者血清IL-17及IL-6水平均有高表达,且与RA病情活动正相关,可能成为用于监测病情的病情活动指标。2RA患者血清IL-23水平有高表达,但与RA病情活动无明显相关关系,说明IL-23参与RA的发病过程,但不与RA病情活动相伴行。3RA患者外周血Th17亚群细胞比例增多,且与RA病情活动相关,说明Th17细胞可能在RA的发病过程中起到一定的作用并与RA的发生发展密切相关。4RA患者外周血Th17亚群细胞比例、IL-17水平、IL-6水平之间互为正相关关系,表明三项指标的增高可能有一定的因果关系,提示在RA病情的发生发展过程中,三项指标与RA患者的病情密切相关,有助于RA患者病情的观察。5IL-23与Th17亚群细胞比例、IL-17水平及IL-6水平均无明显相关关系,表明IL-23可能不参与Th17的增多过程。6Th17亚群细胞及其相关细胞因子在RA的发生、发展过程中起着重要作用。
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